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粘粒和质粒克隆的纯化实验基本方案
材料与仪器质粒LB 抗生素涂布棒 硝酸纤维滤膜步骤1. 通过原位杂交检测硝酸纤维索滤膜上影印菌落。2. 用无菌的牙签挑出阳性克隆，接种到含适当抗生素的1 m
2024-06-08 134 -
变性凝胶电泳实验（含甲酰胺的测序胶）
原理聚丙烯酰胺凝胶加人甲酰胺可以使造成条带压缩的测序产物的二级结构不稳定。材料与仪器DNA甲酰胺 甲醇 乙醇 TEMED SDS电泳仪步骤1. 按基本方案步骤
2024-06-08 113 -
变性凝胶电泳实验（电解质梯度测序胶）
原理通过简单地提高下槽缓冲液的盐浓度，使凝胶底部的离子強度得以提高，在电泳过程中，盐离子可以电泳进入凝胶并产生重复性好的及有效的梯度。材料与仪器DNATBE 乙
2024-06-08 112 -
变性凝胶电泳实验（缓冲液梯度测序胶）
原理在本实验方案，测序胶底部的缓冲液浓度大于其顶部浓度，使得短寡核苷酸片段（胶底部）的迁移率相对比长寡核苷酸（顶部）的迁移率要慢一些，这洋凝胶可电泳更长的时间而
2024-06-08 122 -
变性凝胶电泳实验基本方案
材料与仪器DNA乙醇 异丙醇 二甲基二氯硅烷 TEMED 变性丙烯酰胺溶液 SDS电泳仪 注射器 巴斯德吸管 干胶机步骤1. 制作每块凝胶时，首先要用肥皂及水
2024-06-08 90 -
寡核苷酸介导的诱变实验基本方案
材料与仪器大肠杆菌PEG TE ATP 寡核苷酸诱变引物 T4多核苷酸激酶 EDTA SSC水浴锅 电泳仪 培养箱步骤1. 将一个单链噬菌体产生的噬斑转移至含
2024-06-08 110 -
简并寡核苷酸诱变实验（小段DNA序列中产生大量突变）
材料与仪器大肠杆菌DNA聚合酶 dNTP 甘油 NaCl EDTA SDS 无水乙醇水浴锅 离心机 分光光度计步骤1. 设计寡核苷酸，其3‘端含有由8个核苷酸
2024-06-08 125 -
基因合成实验
原理基因合成是指在体外人工合成双链DNA分子的技术，与寡核苷酸合成有所不同：寡核苷酸是单链的，所能合成的最长片段仅为100nt左右，而基因合成则为双链DNA分子
2024-06-08 108 -
区域特异性诱变
原理可在长达3‘的克隆化DNA片段上产生大量的随机分布的核苷酸替换突变，在将DNA克隆到一个可用来分离单链DNA的载体后，用各种可造成特定碱基损伤的化学试剂处理
2024-06-08 110 -
定点诱变实验（利用PCR引物点突变）
材料与仪器DNADNA聚合酶 klenow 限制性内切酶水浴锅 离心机 培养箱步骤1. 制备模板（见基本方案，步骤1和2） 2. 合成和纯化寡核苷酸引物并对
2024-06-08 112 -
定点诱变实验基本实验
材料与仪器DNATE 寡核苷酸引物 质粒 dNTP DNA聚合酶 氯仿 石蜡油 无水乙醇离心管 热循环仪 离心机步骤1. 利用突变区两侧的限制性内切酶位点将待
2024-06-08 111 -
磷酸钙介导的真核细胞转染实验（高效转染法）
材料与仪器真核细胞完全培养液 TE BES培养箱 平板步骤1. 转染前一天接种呈指数生长的细胞，密度为5105/10 cm 平板。加10 ml 完全培养液，
2024-06-08 119 -
磷酸钙介导的真核细胞转染实验（磷酸钙法）
材料与仪器真核细胞CaCl2 HEPES缓冲液 氯化铯 PBS培养箱 锥形管 离心管步骤1. 在转染前一天将细胞分入10 cm 组织培养平板中。当被转染的细胞
2024-06-08 131 -
植物原生质体细胞
材料与仪器原生质体细胞电穿孔缓冲液 原生质溶液尼龙筛网 锥形管步骤1. 将小心切成5 mm 的条状无菌植物材料8 ml 原生质体溶液中温育，置于30℃旋转摇床
2024-06-08 105 -
电穿孔转染哺乳动物细胞
材料与仪器哺乳动物细胞完全培养液 电穿孔缓冲液电穿孔仪器 电击池步骤1. 在完全培养液中培养特转染细胞至对数生长晚期，4℃ 640 g 离心5 min，收集细
2024-06-08 119
