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一文带你读懂CHO细胞的前生今世
CHO细胞是最早由Theodore Puck于1956年从中国仓鼠卵巢细胞中分离出来，并被发现可以无限分裂的细胞，是成纤维细胞的一种。CHO细胞因为具有可粘附或
2024-05-20 1065 -
从96孔微培养板生长的哺乳动物细胞中分离DNA
原理本方案由 Ramirez-solis 等的方法 1992，1993 改进而成，是一种从微培养板的每个孔生长的真核细胞抽提基因组 DNA 的简便有效的方法。每
2024-05-20 90 -
Southern印迹(毛细管法将DNA转移到膜上)
原理制备基因组 DNA 样品首先要经过一种或多种限制性内切核酸酶的消化，消化后的片段在标准的琼脂糖凝胶上经电泳按照大小进行分离。DNA 经过原位变性后，从凝胶上
2024-05-20 82 -
酵母DNA的快速分离
原理根据该方案制备的酵母 DNA 可以用作 PCR 反应的模板。在 E. coli 和 Saccharomyces cerevisiae 中均能复制的穿梭质粒也
2024-05-20 76 -
用缠绕法从哺乳动物细胞中分离DNA
原理本方法由 Bowtell 法（1987) 改进而成，可同时从许多不同细胞或者组织样品中制备 DNA。本方案中的主要步骤包括将 DNA 沉淀在细胞裂解液和乙醇
2024-05-20 65 -
用甲酰胺从哺乳动物细胞中分离高分子质量DNA
原理本方案是 Kupiec 等所述方法（1987) 的改良版本，包括用蛋白酶 K 消化细胞和组织，用高浓度甲酰胺分离 DNA-蛋白质复合物（染色质用火棉胶袋充分
2024-05-20 84 -
用蛋白酶K和苯酚从哺乳动物细胞中分离高分子质量DNA
原理这一程序改自最先由 Daryl Stafford 及其同事描述的方法（Blin and Stanfford 1976)。 当需要大量哺乳动物 DNA，如用于
2024-05-20 133 -
脉冲场凝胶中浓缩DNA片段的回收
原理低熔点琼脂糖切片中的 DNA 首先通过电泳浓缩进入高百分比琼脂糖凝胶中，然后用琼脂糖酶处理而分离。最终 DNA 制备通过微透析纯化。这种方法在把分离的 DN
2024-05-20 66 -
用一步法从细胞和组织中同时制备DNA、RNA和蛋白质
原理同 Chomczynski 和 Sacchi 两人于 1987 年报道的 RNA 快速提取法一样，这种方法包括用含异硫氰酸胍和酚的一种单相液来裂解细胞。加入
2024-05-20 80 -
聚丙烯酰胺凝胶中DNA的染色检测
原理与琼脂糖凝胶不同，聚丙烯酰胺凝胶灌制时不能加入溴化乙锭，因为此染料会影响丙烯酰胺的聚合。然而，电泳后可用溴化乙锭进行聚丙烯酰胺凝胶的染色。由于聚 丙烯酰胺会
2024-05-20 138 -
变性RNA在膜上的转移和固定
原理多数情况下，为检测特定的靶 mRNA，需先将 RNA 通过琼脂糖电泳分离后，再从胶上转移到二维支持物上，（通常用尼龙膜)，再与持异的标记探针杂交。正如在 N
2024-05-20 75 -
Northern杂交
原理转移并固定到膜上的 RNA 样品可以与特异的探针杂交，从而用来对所感兴趣的 RNA 进行定位。视实验人员和条件的差异，可以从多种方法中选择任意一种来标记和检
2024-05-20 177 -
纯化的RNA的点杂交和狭线杂交
原理点杂交和狭线杂交技术（Kafatos et al. 1979) 用于在同一固相支持物（通常为带电荷的尼龙膜）上固定几种核酸样品，然后用合适的探针与已固定的样
2024-05-20 88 -
用S1核酸酶对RNA作图
原理三种不同的核酸酶——S1 核酸酶、RNA 酶、外切核酸酶Ⅶ被用来进行 RNA 定量，确定内含子位置，以及用来鉴定在克隆的 DNA 模板上的 mRNA 的 5
2024-05-20 150 -
根据大小分离RNA:乙二醛化RNA的琼脂糖凝胶电泳
原理这个方法将乙二醛变性和琼脂糖凝胶电泳结合了起来（从 McMaster 和 Carmichael (1977), Thomas(1983) 的方法修改而来）。
2024-05-20 73
