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去磷酸化的平端或5'凹端DNA分子的磷酸化
原理在 T4 多核苷酸激酶的正向反应中,带有平端、5' 凹端或分子内切口的 DNA 底物比 5' 突出端的分子标记效率低。材料与仪器T4 噬菌体
2024-05-20 66 -
含5’突出羟基端的DNA分子磷酸化
原理本方案用磷酸酶去除核酸的 5' 磷酸根,然后在 T4 噬菌体多核苷酸激酶的催化下,以放射性标记的形式重新将磷酸加到核酸上,这是一种广泛应用于 32P
2024-05-20 90 -
用碱性磷酸酶进行DNA片段的去磷酸化
材料与仪器牛小肠碱性磷酸酶 虾碱性磷酸酶 蛋白酶 K 限制性内切核酸酶 DNA 样品氯仿 EDTA 乙醇 酚 氯仿 SDS 醋酸钠 TE Tris-Cl CIP
2024-05-20 82 -
比较分子生理基因组学 —cDNA阵列的异种杂交实验
材料与仪器步骤一、材料这里用到的所有化学试剂都为分子生物学等级,或者用它们最高纯度的等效物。所有的塑料和玻璃制品,包括瓶子和移液器吸头都要高压灭菌,在核酸实验操
2024-05-20 77 -
用T4噬菌体DNA聚合酶标记双链DNA的3'端
材料与仪器限制性内切核酸酶 T4 噬菌体 DNA 聚合酶 模板 DNA醋酸氨 乙醇 酚 氯仿 T4 噬菌体 DNA 聚合酶缓冲液 dNTP 溶液Sephadex
2024-05-20 69 -
单细胞mRNA差异显示实验
原理##流程图材料与仪器溶液和缓冲液水浴槽 PCR热循环仪 微量离心机 塑料制品和滤器步骤一、RNA 的分离收集对照组和实验组细胞,放入含 45ul2 mmol
2024-05-20 74 -
用随机寡核苷酸延伸法进行扣除cDNA探针的放射性标记
原理此方案中 cDNA 的合成是在 4 种饱和浓度的 dNTP 及一种痕量的放射性标记的 dNTP 中进行的。扣除杂交后,在大肠杆菌 DNA 聚合酶Ⅰ的 Kle
2024-05-20 90 -
体外转录合成单链RNA探针
原理制备特异性的单链 RNA 探针不仅比 DNA 探针更容易,在杂交反应中一般也比具相同比活性的 DNA 探针产生更强的信号,这可能是由于含有 RNA 的杂合链
2024-05-20 80 -
DNA条形码的收集—分析方案实验
材料与仪器步骤材料 方法标本和组织处理大多数标本的条形码分析是直截了当的,但高度依赖于 D N A 的初始条件。因此,必须小心确保样本是在不损伤 D N A
2024-05-20 74 -
用寡聚(dT)作引物合成放射性标记的扣除cDNA探针
原理本方案描述通过与 mRNA 驱动方杂交,继之以羟基磷灰石层析纯化单链放射性标记的 cDNA,制备扣除 cDNA 探针。材料与仪器反转录酶 反转录酶缓冲液 驱
2024-05-20 80 -
用随机寡核苷酸引物从mRNA合成cDNA探针
原理本方案以 poly(A) + RNA 作为模板,通过随机引物反应合成 cDNA 探针,这类探针可用于 cDNA 文库的差异筛选。材料与仪器反转录酶 反转录酶
2024-05-20 64 -
微核实验在染色体水平检测DNA损伤实验
材料与仪器步骤一、材料1. 胞质分裂阻滞微核试验2. 微核的着丝点检测(1)从硬皮病 C R E S T 亚型的患者中取得的血清样本。(2) F I T C 标
2024-05-20 97 -
从M13噬菌体模板合成固定长度的单链DNA探针
材料与仪器大肠杆菌 DNA 聚合酶 I Klenow 片段 限制性内切核酸酶 模板 DNA 寡核苷酸引物乙酸铵 DTT EDTA 乙醇 NaCl 酚 氯仿 TB
2024-05-20 64 -
差异显示PCR
材料与仪器反转录酶 热稳定 DNA 聚合酶 锚定 3‘-寡核苷酸引物 随机 5‘-寡核苷酸引物 总 RNA 带放射标记的 dATP扩增缓冲液 D
2024-05-20 77 -
通过 PCR 方法对微量 DNA 进行定量分析实验基本方案
材料与仪器DNA蛋白酶消化缓冲液 20 mg ml蛋白酶K (储于-20℃) 用 50 mmol L Tris . Cl 10 mmol L EDTA pH 7
2024-05-20 71