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铁蛋白免疫电镜技术原理与操作步骤
(一) 原理 免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体,再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查,观察到铁蛋白抗体所在的位置,即抗原所在。 (二)材料与 试剂 1.马
2025-05-14 138 -
125I标记单克隆抗体技术
(一) 原理氯胺桾即对甲苯碘氯胺钠,在水溶液中生成次氯酸,为一种温和氧化剂,当加入到有蛋白质和碘的弱碱水溶液中,可将I2氧化为I+并结合到氨基酸上。如标记条件温
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荧光素标记抗体技术
(一) 原理 目前用于抗体标记的荧光素主要有异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或罗达明(Lissamine rh
2025-05-14 52 -
干扰素(IFN)生物学活性检测
(一)原理 干扰素能刺激某些指示细胞(如人羊膜上皮细胞Wish株、人喉癌细胞株Hep-2以及人胚肌皮或肺单层细胞)产生抗病毒蛋白,从而使细胞免受水疱性口炎
2025-05-14 73 -
待胶体金标记蛋白质的准备
(一)原理 蛋白质在等电点或稍偏碱的情况下,根据电荷正负相吸的原理;被吸收附于胶体金颗粒表面,使其牢固结合,一般胶体金颗粒表面带负电,与蛋白质所带的正电荷基团间
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淋巴细胞增殖功能的测定
(一) 原理 T细胞、B细胞表面具有识别抗原的受体和有丝分裂原受体,在特异性抗原刺激下可使相应淋巴细胞克隆发生增殖。植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(Co
2025-05-14 73 -
间接凝集反应技术(Indirect agglutination reaction technique)
(一)原理 可溶性抗原(或抗体)吸附于免疫学反应无关的颗粒(称为载体)表面上,当这些致敏的颗粒与相应的抗体(或抗原)相遇时,就会产生特异性的结合,在电解质参与下
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淋巴细胞杂交瘤技术的常用实验动物
(一)小鼠BALB/C系 它是此技术中最常用的动物。目前用于细胞融合的小鼠骨髓瘤细胞几乎都来源于BALB/C系小鼠。其杂交瘤可接种于BALB/C或它的杂交第
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相关白细胞及其它因素测定
(一)嗜酸性粒细胞计数 嗜酸性粒细胞参与Ⅰ型变态反应,因此嗜酸性粒细胞增多可作为Ⅰ型变态反应的辅助诊断指标,而且可作为疗效判定的指标之一。 嗜酸性粒细胞
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单克隆抗体技术:细胞融合
(一)融合剂 细胞融合的方法有物理法,如电融合、激光融合,化学融合法和生物融合法,如仙台病毒,此处例举化学融合法中的一种即聚乙二醇融合法。 聚乙二醇(PEG),
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酶 标记 抗体
(一) 酶制剂及其底物 凡无毒性又能呈现有色化学反应的酶,原则上均可作为标记用。但作为标记抗体用的酶应满足下列要求:(1)来源方便,易于纯化;(2)比活性高
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淋巴细胞检测和狼疮细胞试验
(一)淋巴细胞检测 虽然自身免疫病多与自身抗体有关,但仍有部分疾病不存在相关的自身抗体,而与致敏淋巴细胞有关,还可能与免疫调节异常或其他因素有关。这些相关因
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抗Ig抗体的制备
(一)抗原制备 Ig是免疫球蛋白,对异种动物而言,是良好的抗原物质。可以刺激异种动物产生抗Ig血清,经适当提取后,产生抗Ig抗体,又叫第二抗体或抗抗体。在多数的
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制备单克隆抗体的基本技术
(一)抗原提纯与动物免疫 对抗原的要求是纯度越高越好,尤其是初次免疫所用的抗原。如为细胞抗原,可取110 7 个细胞作腹腔免疫。可溶性抗原需加完全福氏佐剂并
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抗体检测及杂交瘤细胞的选择
(一)抗体检测 用检测抗体的方法从杂交细胞中筛选出生产指定抗体的杂交株是很重要的。检测抗体的方法很多,从沉淀反应到放射免疫测定。由于 细胞培养 液中的抗体浓度通
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