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流式细胞仪-细胞凋亡检测
一 PI单染色法 基本原理 其原理主要是根据细胞 凋亡时在细胞、亚细胞和分子 水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分
2025-06-09 62 -
构成抗原的条件
一. 影响免疫原性的因素(免疫原性基础)(一)抗原因素:1.分子量:一般是分子量越大,免疫原性越强。2.化学组成及结构:蛋白质:A.氨基酸组成 --- 含芳香族
2025-06-09 78 -
活细胞间接免疫荧光法
一.实验器材:1 . 器材:40 孔塑料板、 40 孔板离心机、微量加样器、振荡器、盖玻片、荧光显微镜等2 . 试剂:单抗隆抗体(单抗)、荧光标记抗鼠免
2025-06-09 82 -
抗原的类型
一.根据抗原性质: 完全抗原(complete antigen):具有免疫原性和抗原性的物质,如:蛋白质、细菌、病毒等。 半抗原(hapten,或不完全抗原in
2025-06-09 75 -
Western Blotting 每步操作详解
一.配胶 注意一定要将玻璃板洗净,最后用ddH2O冲洗,将与胶接触的一面向下倾斜置于干净的纸巾晾干。 分离胶及浓缩胶均可事先配好(除AP及TEMED外),过滤后
2025-06-09 119 -
免疫球蛋白的基因结构及其表达
一.免疫球蛋白的基因库 H基因库(重链基因连锁群):--- 第14号染色体 κ基因库(κ链基因连锁群):--- 第2号染色体 λ基因库(λ链基因连锁群):---
2025-06-09 45 -
免疫亲和层析的基本过程
一.概要对蛋白质(抗原)的纯化率为1000~10000倍。快速纯化抗原,层析柱一般可重复使用。可获得纯化的抗原。不能用于定量测定。纯化效果取决于待纯化抗原的浓度
2025-06-09 72 -
医学上重要的抗原
一. 病原微生物:1.细菌性抗原:细胞壁:蛋白质、脂多糖等。鞭毛:蛋白质菌毛:蛋白质夹膜:多糖2.病毒性抗原:衣壳:蛋白包膜:糖蛋白3.其它:立克次体、螺旋体、
2025-06-09 88 -
各类免疫球蛋白的特性和功能
一.IgG:再次免疫应答产生的主要Ig, 产生部位主要是脾脏和淋巴结一般特性:单体分子;四个亚类;(CH的DNA序列同源性:90-95%);血清中含量最高(75
2025-06-09 70 -
HLA分子结构与功能
一. HLA-Ⅰ类分子的分布、结构和功能1. 分布:有核细胞(含血小板和网织红细胞)表面。存在形式:膜结合:不同的组织细胞表达Ⅰ类分子量不同,如:淋巴细胞(最多
2025-06-09 77 -
外周血白细胞的分离
一、自然沉降法 人外周血红细胞与白细胞的比例约为6000~1000:1,两类细胞的沉降速度不同,据此加以分离。自然沉降法是利用红细胞自然沉降率较快加以分离。该法
2025-06-09 69 -
杂交瘤技术基本程序与方法
一、杂交瘤技术的诞生淋巴细胞杂交瘤技术的诞生是几十年来免疫学在理论和技术两方面发展的必然结果,抗体生成的克隆选择学说、抗体基因的研究、抗体结构与生物合成以及其多
2025-06-09 75 -
辛酸/硫酸铵法提纯IgG
一、原理在酸性条件下( pH4.5),非1gG的蛋白成份(包括白蛋白,部分Ig),能被辛酸等短链脂肪酸沉淀,上清中剩余的蛋白主要为IgG,再用硫酸铵沉淀上清,即
2025-06-09 77 -
抗体纯化:SPA-sepharose cl-4b 亲合层析法
一、原理葡萄球菌a蛋白(SPA)具有与多种哺乳动物IgG分子fc段结合的能力,并与不同IgG亚类的结合力有所差别。改变pH及离子强度可洗脱结合于SPA-sepH
2025-06-09 49 -
抗体纯化:deae-sephadex a-50 柱层析法
一、原理deae-sephadex a-50(二乙氨基—乙基-葡萄糖凝胶a-50)为弱碱性阳离子交换剂。用NaOH将Cl-型转变为OH-型后,可吸附酸性蛋白。血
2025-06-09 106