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双向琼脂扩散实验
一、原理 双向琼脂扩散实验,是将抗原和相应抗体分别加入同一凝胶板内的相邻小孔中。两者相互扩散,当扩散到他们的浓度比例合适的部位相遇时,就会形成抗原抗体复合物的沉
2025-06-09 81 -
免疫火箭电泳技术
一、原理定量的抗原加入到含有一定量的相应抗体的琼脂糖凝胶中,在电场作用下,引起抗原抗体的迁移和相互反应,当比例合适时形成肉眼可见的沉淀峰,由于电泳继续进行,样品
2025-06-09 77 -
巨噬细胞的纯化
一、用帖壁法纯化巨噬细胞 1.用含20%~40%小牛血清的RPMI-1640培养液将巨噬细胞配成2106 ~4106 /ml的浓度。以每平方厘米2105 ~4
2025-06-09 80 -
流式细胞术中为什么要用同型对照?如何选择同
一、为什么要用同型对照? 同 型对照是使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的免疫球蛋白及亚型的免疫球蛋白,用于消除由于抗体非特异性与细胞结合而产生的
2025-06-09 90 -
免疫组化双染实验流程
一、脱蜡和水化方法同SP法。二、第一抗体的染色1、将切片浸在3%H2 O2 甲醇溶液(新鲜配制)中10 min,PBS冲洗3 min3次;2、加100 ul(2
2025-06-09 108 -
流式细胞术分离法分离T淋巴细胞和B淋巴细胞
一、试剂及配制1. RPMI-1640培养基:应选购不含酚红的,使用时加入5%的小牛血清。2. FITC-抗CD3单克隆抗体:FITC为异硫氰酸荧光素,CD3为
2025-06-09 89 -
辛酸-硫酸铵法从人血清中纯化IgG
一、实验目的1、初步掌握从血清中提取纯化IgG的方法步骤。2、了解辛酸-硫酸铵法纯化IgG 的原理。二、实验原理辛酸-硫酸铵法分两步进行。第一步用辛酸沉淀杂蛋白
2025-06-09 88 -
抗体的功能
一、识别并特异性结合抗原( Recognition and bind antigen specifically ) 识别并特异性结合抗原是免疫球蛋白分子的主要功
2025-06-09 59 -
石蜡切片时的小技巧
一 、石蜡切片方法步骤: 在每次操作切片刀和标本,或更换标本前一定要锁定手轮,并用护刀罩将刀 刃遮住!锁定手轮, 应先夹紧标本再装切片刀
2025-06-09 48 -
流式细胞仪多色染色与同型对照抗体选择与搭配
一、如何搭配流式抗体荧光标记流式抗体荧光标记搭配主要由3个因素决定的:流式细胞仪能检测多少个通道需要同时检测检测多少个指标厂家的抗体有多少种荧光标记如果流式细胞
2025-06-09 71 -
多克隆抗体的提取纯化
一、批量提取法称取DEAE-纤维素(DE32或DE52)50g,置于1000ml烧杯中,先以蒸馏水漂浮除去细颗粒,再经酸碱处理后,用0.01~0.05mol/L
2025-06-09 87 -
免疫荧光双标技术中操作要点和注意事项
一、免疫荧光的标本制作的基本程序同DAB显色的免疫组化,不同点如下:1、免疫荧光不需要使用双氧水处理,封闭和一抗孵育与其它相同。2、免疫荧光的二抗使用不同荧光标
2025-06-09 77 -
免疫荧光技术的实验方法及其分类
一、免疫标记法及其分类1.荧光免疫法原理是应用一对单克隆抗体的夹心法。底物用磷酸-4-甲基伞形酮,检测产物发出的荧光,荧光强度与Mb浓度呈正比,可在8min内得
2025-06-09 75 -
抗原多肽设计和选择的基本原则
一、抗原多肽设计的基本原则为了使生产抗体获得最佳效果,仔细地设计抗原多肽是很有必要的,设计应满足一个基本条件:在免疫过程中,该抗原既不会产生过强的免疫反应,同时
2025-06-09 65 -
类病毒
一、类病毒�20 世纪 70 年代初期,美国学者 Diener 及其同事在研究马铃薯纺锤块茎病病原时,观察到病原无病毒颗粒和抗原性、对酚等有机溶剂不敏感、耐热
2025-06-09 88