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抗体纯化:冷酒精沉淀法
1、 血清加3倍体积的蒸馏水,调节 pH至7.7()冷却到0℃。在激烈搅拌的条件下,加预冷的酒精(-20℃)到最终浓度为20%,保持在-5℃。产生的沉淀(a),
2025-05-28 50 -
免疫组化SABC法操作流程
1、洗载玻片将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中,目的是为了是载玻片上的硅胶等除去,同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整,便于组织吸附,然后置于清水
2025-05-28 66 -
免疫荧光常见问题总结
1、问:免疫荧光:用免疫荧光方法做同样的内容,组织切片和培养细胞,两者操作过程中有哪些不同?参考见解:只是固定方法不同,细胞固定用甲醇,切片固定用多聚甲醛,而染
2025-05-28 72 -
McAb的制备方法
1、体外培养 在细胞培养过程中杂交瘤细胞能产生和分泌McAb,但是一般产生的抗体量很少,约10~100μg/ml。近年来发展了各种新型培养技术和装置,包括用无血
2025-05-28 74 -
实验动物免疫方案
1、抗原: 蛋白质、多肽、细胞器、细胞、组织等。2、免疫方式:皮下注射、腹腔注射、静脉注射、肌肉注射等。3、不同动物免疫所需抗原量(以蛋白免疫为例)动物 抗原量
2025-05-28 72 -
细菌数量的测定方法
1、计数器测定法: 即用血细胞计数器进行计数。取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内,用显微镜观察计数。由于计数室的容积是一定的(O.1mm3)
2025-05-28 82 -
免疫细胞化学图像分析常用的测量参数
1、灰度 灰度(grey level)指图像各种分颜色的深浅程度。比较高级的图像分析仪可将灰度分成为256级,也有的只能将灰度分成64级,总之都是2n ,24
2025-05-28 72 -
单克隆抗体制备详述
1、动物免疫(1) 抗原制备制备单克隆抗体的免疫抗原,从纯度上说虽不要求很高,但高纯度的抗原使得到所需单抗的机会增加,同时可以减轻筛选的工作量。因此,免疫抗原是
2025-05-28 82 -
流式细胞周期检问答
1、Q:要做胃粘膜组织的DNA含量及倍体检查,但取材后要等几个星期才会做流式细胞术检查,请问:胃组织要怎样保存好呢?用低温保存,还是用乙醇固定?或者固定后再低温
2025-05-28 63 -
流式细胞凋亡检测问答
1、Q:rh Annexin V R-PE 20 tests是BD公司用于凋亡流式检测的试剂盒,产品显示种属为人,请问能否用于大鼠细胞的检测?A:可以。因为An
2025-05-28 60 -
用sephadex G-25脱盐,如何选择缓冲液
1) 如果我用sephadex G-25脱盐,如何选择缓冲液?因为我认为,如果选择含盐的缓冲液,本身带入了盐,能起到脱盐的效果吗?如果选择含盐的缓冲液,缓冲液里
2025-05-28 59 -
从免疫亲和层析柱上洗脱抗原方法
【准备工作】 此步骤最大的难点是确定恰当的洗脱条件。为了获得一个清晰的洗脱峰和较纯的抗原,需要花费大量的时间进行试验和调整洗脱条件。 【溶液和特别设备】 (1)
2025-05-28 72 -
荧光抗体的制备
1 荧光素与抗体结合(标记) 2 荧光抗体的纯化 3 荧光抗体的鉴定 1.荧光素与抗体结合方法: ⑴ 透析法:①适用于蛋白质含
2025-05-28 74 -
抑制B淋巴细胞瘤生长的嵌合抗CD20基因工程抗体
【摘要】目的 构建抗CD20嵌合抗体Fab'和F(ab)2片段表达载体,并在大肠杆菌中进行高效可溶性分泌表达,比较二者的活性差异。方法 从相应的杂交瘤中
2025-05-28 58 -
微型双功能抗体抗CD3/抗Pgp的构建和表达
【摘要】目的 构建和表达抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体,并测定该微型双功能抗体的生物学活性。方法 采用PCR和overlap PCR方法构建抗CD3/抗CD2
2025-05-28 72