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酵母表达系统
基因表达是分子生物学领域的重要内容之一,人们利用基因表达技术制备各种目的基因的重组蛋白质,在分析基因的表达与调控、基因的结构与功能、基因治疗以及生物制药等领域均
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细胞培养基础篇
基础篇-无菌操作基本技术1. 实验进行前,无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌,以70% ethanol擦拭无菌操作
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小鼠单个核细胞分离一步梯度法去除死细胞
基本原理活细胞(密度较小)和死细胞(密度较大)密度不同,从而有助于将活的淋巴细胞和红细胞分离。附加材料高密度溶液:Ficoll-Paque(Ficoll和泛影酸
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细胞内糖类染色方法—过碘酸席夫反应法
基本原理过碘酸是一种强氧化剂,过碘酸的氧化作用先使糖分子的乙二醇基变为乙二醛基,乙二醛基继而与Schiff试剂结合,Schiff试剂本为无色亚硫酸品红复合物,但
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原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法
基本原理:吖啶橙(acridine orange,AO)是一种常用荧光染料,吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力,但有一定的特异性,即结合后发不同颜色的
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FITC标记抗体-Marsshall氏法
材料: 抗体球蛋白溶液、0.5mol/L pH9.0碳酸盐缓冲液、无菌生理盐水、异硫氰酸荧光素、1%硫柳汞水溶液、三角烧瓶(25—50ml)、冰及
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PriCells: 磁珠法分离小鼠T细胞和B细胞
基本方案用AUTOMACS系统进行总T细胞、CD4+ 细胞或CD8+ T细胞的自动分离实验材料1、小鼠2、HBSS洗涤缓冲液3、MACS缓冲液4、磁珠5、RPM
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细胞介导细胞毒作用检测法-[3H]脱氧胸苷释放法
[ 3 H] 脱氧胸苷释放法1 )标记靶细胞1.用含5%小牛血清的RPMI-1640培养液将靶细胞配成210 6 /ml,取10μCi(370kBq)[ 3 H
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移液器的正确操作和注意事项
很多初次使用移液器的人,总以为移液器的操作非常简单,其实不然。移液器的操作是科学试验的第一步,是一个非常基础的试验操作,但绝大多数人对移液器的操作都有偏见。其实
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293/293T细胞
关于293/293T细胞1、种属都为人,不是鼠。2、来源:293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系,293T细胞由293细胞派生,同时表达SV40大T抗
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原核细胞和真核细胞的演化过程
根据结构的不同,细胞划分为两大类:原核细胞和真核细胞。原核细胞结构比较简单,由细胞壁、细胞膜、细胞质和核区组成;核区只是一团核物质,外面没有界膜,不是一个成形的
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细胞系或细胞株的建立
各种已被命名和经过细胞生物学鉴定的细胞系或细胞株,都是一些形态比较均一、生长增殖比较稳定的和生物性状清楚的细胞群。因此凡符合上述情况的细胞群也可给以相应的名称,
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细胞系的建立
各种已被命名和经过细胞生物学鉴定的细胞系或细胞株 ,都是一些形态比较均一、生长增殖比较稳定的和生物 性状清楚的细胞群。因此凡符合上述情况的细胞群也可 给以相应的
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革兰氏染色法(原理、方法和意义)
革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,这种染色法是由一位丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰(Hans Christian Gram,1853年-1938年
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动物细胞培养技术(大规模培养、灌注培养、无血清培养)
1 .固定化动物细胞大规模培养技术 2. 动物细胞的灌注养方法 3. 动物细胞无血清培养技术 4. 动物 细胞培养 生物反应器前言 动物细胞培养开始于本世纪初