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  • 细胞转染实验方法有哪些?

    细胞转染实验方法有哪些?

    1. 脂质体法。中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA,借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。带正电的阳离子脂质体则不同,DNA并没有预先包埋在脂质体中,而是带负电的DNA

  • 细胞DNA转染效率影响因素

    细胞DNA转染效率影响因素

    1.组织培养试剂优化细胞生长条件。只使用新鲜配制的培养基和添加剂,并经可能减少所用试剂的变更。基础培养基—目前所使用的各种市售培养基(如,RPMI 1640和D

  • 影响RNA转染的因素

    影响RNA转染的因素

    转染试剂转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA大

  • 病毒感染细胞实验整体流程

    病毒感染细胞实验整体流程

    目的基因不能直接整合到大多数真核细胞,常用的手段是将目的基因包装成病毒来感染细胞,从而得到表达满足实验需求。病毒有很多种,常见的有慢病毒和腺病毒。关于慢病毒和腺

  • 如何判断细胞是否被污染?

    如何判断细胞是否被污染?

    发生污染,既耽误时间又是一个灾难,熟练的无菌操作能避免许多问题,但早期检测污染是一种可以预警的方法。对于培养箱中的每瓶细胞都要注意观察,要养成习惯,每次打开培养

  • 细胞的冷冻和储存

    细胞的冷冻和储存

    细胞生长时的表型会发生改变或漂变,所以细胞必须计数,计数后应马上冻存。冷冻细胞前检查冷冻细胞所需试剂和器具是否备齐。确认有无菌的可用于冷冻的冻存管 。确认液氮罐

  • 悬浮细胞的分瓶操作步骤

    悬浮细胞的分瓶操作步骤

    悬浮细胞的分瓶轻轻的摇匀培养瓶中的细胞培养物,吸出1 ml 到微量离心管中。对细胞进行计数,同时观察细胞状态。计算出稀释倍数,决定种子液的量。吸出适量的细胞到新

  • siRNA转染后出现细胞死亡是什么原因?

    siRNA转染后出现细胞死亡是什么原因?

    转染后细胞死亡,原因也是多样的,如脂质体毒性,转染浓度过高,转染前的细胞状态不佳等都可能导致转染后细胞死亡的情况发生,这种情况下就需要适当优化转染条件;可以选择

  • 磷酸钙-DNA共沉淀法的原理和步骤

    磷酸钙-DNA共沉淀法的原理和步骤

    前些时间有微友在平台上咨询细胞转染的事项,并对一篇博客文章《为什么磷酸钙转染并不稳定?为什么磷酸钙转染并不经济?》比较感兴趣。在这里,对这位微友的疑惑进行更加全

  • 脂质体细胞转染试剂的缺点

    脂质体细胞转染试剂的缺点

    已有众多的文献报道,脂质体本身会参与细胞生理活动,引起基因表达的上调或下调。如参与PKC(蛋白激酶C)通路调节(Biochemistry.1992 Se

  • 细胞转染实验注意事项

    细胞转染实验注意事项

    1.如为贴壁生长细胞,一般要求在转染前一日,必须应用胰酶处理成单细胞悬液,重新接种于培养皿或瓶,转染当日的细胞密度以70-90%(贴壁细胞)或2106-4106

  • Jurkat E6-1细胞的电转染条件是什么?

    Jurkat E6-1细胞的电转染条件是什么?

    使用Entranster-E电转液与指数衰减脉冲电转仪时Jurkat E6-1细胞的电转染条件是:对于0.2 cm电转杯,细胞密度为1010^6 cells/m

  • 细胞转染实验中易出现的问题

    细胞转染实验中易出现的问题

    细胞转染是细胞生物学和分子生物学的一种常用的技术手段。而转染效率低下却是实验人员经常遇到的问题,尤其是原代细胞转染,转染难度更大。现分享几个细胞转染实验中易出现

  • 怎么样做好siRNA细胞转染实验?

    怎么样做好siRNA细胞转染实验?

    1.纯化siRNAsiRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸

  • 体外培养细胞的一般性质(二)

    体外培养细胞的一般性质(二)

    体外培养细胞的功能表达(分化)由于体外细胞培养的过程是不断选择具有分裂增殖能力细胞群的过程,所以细胞群一直处于变化中。体外的细胞培养物逐渐会变为处于动态平衡的由