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细胞培养常见问题解答
一、培养板接种和换液相关 1、6孔板接种和换液(1)问:我的细胞传代很正常,但一种到六孔板里(不管加药和对照),总有两三个孔(随机)细胞长得不好,很小,像破碎了
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经验总结:关于细胞消化
一、酶消化法1. 胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大,从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作
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细胞培养小技巧---操纵时间的艺术
众所周之,每次给细胞换液体的时候都需要把细胞拿出来,然而就这一拿,“学问”就在里面:我们要尽量缩短细胞在培养箱外面的时间,尽量增加细胞在最适环境中的时间。换液流
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禽马立克氏病病毒转化的T淋巴细胞系MSB1的传代
特性:悬浮细胞培养条件:37度 5% CO2培养(方瓶站立培养)营养需求:1640+15%FCS+10%TPB+100U双抗+100U两性霉素,状态不佳时适当地
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血清使用过程中应注意的问题
一、关于血清使用的几点建议:1、血清必须贮存-20℃,如存放于4℃,请勿超过两周,对于某些单位一次无法用完一瓶,可在无菌条件下将其40-45ml分装于无菌50m
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小鼠树突状细胞培养攻略
一、方法 根据1999年lutz的方法,做了一些改进,培养DC很多人用的是高浓度的细胞,高浓度的因子,但是这样产量不高,我每一次分离一只小鼠的骨髓,大约可以得到
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传代细胞的培养和维持
一、传代细胞的传代培养(1)吸除或倒掉原瓶中的旧培养基(以25mL培养瓶为例)。(2)每瓶加入2mL,无钙、镁PBS,漂洗一次后倒掉。(3)每瓶加入1mL消化液
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细胞培养中常见的污染情况总结
一、常见的污染如下:1. 细菌:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。仔细检查一下器
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原代培养海马神经元经验
一、常规的试剂配制:1、培养基:选用高糖型DMEM/F12 (1:1)培养基干粉(含15 mmol Hepes),每升培养液中加入碳酸氢钠1.8 g,调节pH值
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乳鼠心肌细胞培养方法详述
一、材料所需液体:Hanks液、低糖DMEM液、高糖DMEM液、胰酶消化液、双抗液、碳酸氢钠液、盐酸液。试剂 Trypsin, SDS, DMEM 均购于 Si
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LAK/TIL细胞的制备
一、LAK细胞的制备试剂及材料1. PHA2. rhIL-23. 20%NCS-RPMI-1640培养液操作方法1. 常规分离PBM或将正常人外伤摘除的脾脏按常
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细胞培养室的设置、设备和准备工作
一、 细胞培养实验室的设置及设备(一)细胞培养实验室的设置组织细胞培养技术与其他一般实验室工作的主要区别在于要求保持无菌操作,避免微生物及其他有害因素的影响。目
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细胞培养基大全
一、 细胞培养基的概念和原理细胞培养基是人工模拟细胞在体内生长的营养环境,是提供细胞营养和促进细胞生长增殖的物质基础。培养液或培养基的含义几乎相同,英文都是me
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神经干细胞的培养
一、 神经干细胞的分离和传代无菌条件下取新生SD大鼠(出生48h内)脑组织,D-Hanks液充分漂洗后,在解剖显微镜下剥离脑膜,准确分离海马,用眼科剪将海马剪碎
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大鼠皮层神经元原代培养
液体配制:硼酸硼砂缓冲液:0.05M四硼化钠45ml,0.2M硼酸55ml,pH8.4;胰酶-EDTA消化液:胰酶-0.125g;EDTA-0.2g;D-Han