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详细版:western-blotting实验方案
本文详细介绍western-blotting的实验方法步骤,主要包括了配胶、样品处理、电泳、转膜、封闭及杂交、发光鉴定、增强敏感性、NC膜的多次使用等7个方面的
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转染细胞的稳定筛选方法
1.确定抗生素作用的最佳浓度:不同的细胞株对各种抗生素有不同的敏感性,因此在筛选前要做预试验,确定抗生素对所选择细胞的最低作用浓度。① 提前24 小时在96 孔
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Northern blotting
Northern 杂交(Northern blotting) 1979年,J.C.Alwine等提出:将电泳凝胶中的RNA转移到叠氮化的或其他化学修饰的活性
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SOUTHERN BLOT的步骤(英文)
SOUTHERN BLOT的英文步骤,你懂得。1. Run the gel as normal. Often for genomic southerns it
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PVDF膜上蛋白的可逆染色的几种方法
Western杂交时,为确认蛋白是否转至PVDF膜上,可用下列方法对膜上蛋白进行可逆性染色。1. 氨基黑染色染液:0.5% Amido Black (w/v),
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初学者的Southern杂交与化学发光检测
本期主题为“水稻基因组 DNA的 Southern杂交与非放射性ECL直接核酸标记及检测”,主要是满足初学者对Southern杂交的了解。 Southern杂交
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印迹(blotting)
印迹(blotting)是生物学实验中常用的检测和分析方法。印迹(blotting)实验的过程可以简单描述为将待检测的生物大分子 经电泳等方法分离后转移并固定在
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Western Blot免疫印迹实验原理/试剂准备等操作规程
Western免疫印迹(western blot )是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物
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几种核酸杂交技术的比较 点杂交实验原理、步骤
本文主要简单阐述了Southern杂交、Northern杂交、原位杂交 、点杂交这几种核酸杂交方法的异同点。并介绍了点杂交的基本概念及实验原理、方法。(1)几种
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Northern杂交实验指导之七:结果检测
Northern Blotting技术专题&NBS p;方法一、化学发光检测试剂及其配制:洗膜缓冲液:100mmol Maleic acid150mmol Na
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Northern blotting步骤
Northern Blotting技术专题1. 取RNA2. 将电泳槽 和板,梳齿浸泡在3%H2O2中20-30分钟,并吹干3. 跑1%琼脂 糖凝胶,检测样本R
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Northern杂交实验指导之三:DNA片断亚克隆
Northern Blotting技术专题A. 载体选择为了获得能够在体外转录 RNA探针的DNA模板,其克隆载体必须带有可供选择的特异转录启动子,同时,为了获
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Northern杂交实验指导之四:模板DNA制备
Northern Blotting技术专题A.质粒 DNA的小量提取试剂及其配制含AP的LB液体培养基TE缓冲液:10mmol/L Tris-HCl (pH 8
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Northern杂交实验指导之一:RNA提取
Northern Blotting技术专题方法一、改良异硫氰酸胍提取法试剂及其配制异硫氰酸胍变性液:贮存液-在含484ml 水(经DEPC处理), 17.6ml
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Northern杂交实验指导之六:印迹杂交
Northern Blotting技术专题探针 准备DIG标记的RNA探针与DNA探针相比,显示较强的杂交信号和较地的非特异性背景,因此,只要可能选用RNA探针