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操作维修

胶原纤维染色

2021-07-28 操作维修 加入收藏
原理胶原纤维是由胶原蛋白聚合与缠绕嫘旋排列而成的,具有双折光性,经过特殊染色后,能够在偏光显微镜下观察到四种不同型的胶原纤维。由于胶原纤维分子中含有碱性氨基酸,能够与酸性染料进行结合反应。常用丽春红-苦味酸(2,4,6-三硝基苯酚)染色法。材料与仪器石蜡组织切片丽春红 S 水溶液 苦味酸饱和液 无水乙醇 二甲苯 中性树胶过滤纸步骤丽春红-苦味酸染色液:0.5% 丽春红 S(Ponceau S)水溶

原理

胶原纤维是由胶原蛋白聚合与缠绕嫘旋排列而成的,具有双折光性,经过特殊染色后,能够在偏光显微镜下观察到四种不同型的胶原纤维。由于胶原纤维分子中含有碱性氨基酸,能够与酸性染料进行结合反应。常用丽春红-苦味酸(2,4,6-三硝基苯酚)染色法。


材料与仪器

石蜡组织切片
丽春红 S 水溶液 苦味酸饱和液 无水乙醇 二甲苯 中性树胶
过滤纸

步骤

丽春红-苦味酸染色液:0.5% 丽春红 S(Ponceau S)水溶液 12 ml,苦味酸饱和液 88 ml。


1. 石蜡组织切片,常规脱蜡至水。


2. 丽春红-苦味酸染色液染色 5 min。


3. 直接用无水乙醇分化与脱水。


4. 用过滤纸吸干。


5. 二甲苯透明和中性树胶封固。


注意事项

1. 丽春红-苦味酸混合液可室温存放,使用滴染方法。


2. 无水乙醇脱水时,应将切片斜放,减少多余水分。


常见问题

结果:胶原纤维呈红色,背景呈黄色。


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