肝炎病毒感染的实验室诊断
简介
肝炎病毒是指一组主要侵犯肝脏引起病毒性肝炎的病原体,其中有些也可引起脑、肺和心脏的损害。病原学来源不同的肝炎其实验室检测差异较大,病原学诊断主要涉及甲、乙、丙、丁、戊五型,包括各种肝炎病毒的核酸定性及定量,抗原组分及抗体等三个层次的检测,检查的目的是明确肝炎病因及病毒核酸复制的情况,以协助临床诊断和治疗、流行病学调查以及环境监测。
原理
目以 HAV 和 HBV 感染为例,HAV 感染的实验室检测主要包括三个方面:① 在潜伏期或急性期检查粪便中的甲型肝炎病毒抗原,因为量少且持续时间短,实际很少应用;② 检测发病早期和恢复期双份血清中的抗 HAV 抗体;③ 检测单份血清中抗 HAV IgM 抗体,以区别急性感染与既往感染。
HBV 感染的实验室检测主要包括四个方面:生物化学检测,HBV 血清标志物检测、HBV 分子生物学诊断以及 HBV 临床药物疗效检测。HBV 病原学诊断主要依据 HBV 血清标志物作出判断,包括病毒的抗原抗体及病毒的核酸两方面。
材料与仪器
器材:抗 HAV IgM 单份血清
步骤
肝炎病毒感染的实验室诊断主要根据血清学标志物作出诊断,包括抗原抗体和病毒核酸的检测。
(一)HAV 感染的诊断标准
抗 HAV IgM 单份血清阳性即可作出 HAV 近期感染的诊断,是目前甲肝病原学诊断最常用的特异性诊断方法。另外检查粪便中的抗 HAV SIgA 也有助于本病的诊断。检测抗 HAV IgG 有助于流行病学调查。病毒的直接分离鉴定及其抗原检测一般不作为常规诊断方法。
(二)HBV 感染的诊断标准
具备急,慢性肝炎的临床表现,而血清标志物 HBsAg ,HBeAg、HBV DNA-P 或抗 HBc IgM 中有一项阳性时,可确诊为乙型肝炎。单独抗 HBe 或抗 HBe IgG 阳性时,需同时伴有上述血清标志物中的一项阳性才能确诊。抗 HBs 单独阳性,而其血清浓度大于 10 mIU/ml 时,可基本排除乙型肝炎。
缺乏临床表现而 HBsAg 阳性,伴有或不伴有其他血清标志物时,可诊断为无症状 HBsAg 携带者。
(三)HCV 感染的诊断际准
临床 HCV 感染的早期诊断可大大提高抗病毒药物的治愈率。
1.急性丙型肝炎感染的诊断
(1)HCV RNA 阳性,抗 HCV 阴性,提示患有急性丙型肝炎。
(2)HCV RNA 和抗 HCV 均阴性,可排除急性丙型肝炎。
(3)HCV RNA 阴性,抗 HCV 阳性,可排除急性丙型肝炎。
(4)HCV RNA 和抗 HCV 均阳性,应注意鉴别急性丙型肝炎与慢性丙型肝炎的急性发作。
2. 慢性丙型肝炎感染的诊断
(1 ) HCV RNA 和抗 HCV 均阳性,可确诊为丙型肝炎。
(2)HCV RNA 阳性,抗 HCV 阴性,可见于免疫抑制治疗患者、严重免疫缺陷患者。
(3)健康普查中抗 HCV 阳性者,可检测 HCV RNA 来确定是否为慢性丙型肝炎感染。
3.婴儿丙型肝炎垂直感染的诊断
(1)婴儿出生后 18 个月仍能检测到抗 HCV。
(2)婴儿出生后 36 个月可检测到 HCV RNA ,并且需两次阳性。
(3)婴儿血清 ALT 升高。
(4)母亲和婴儿病毒基因型一致。
4. HCV 感染患者漏诊和误诊可能的原因
(1)病程处于窗口期。
(2)患者免疫系统受到抑制、免疫功能低下。
(3)病毒株的变异。
(4)受检测的血清中病毒拷贝数过低。
(5)血清的交叉反应。
(四)HDV 感染的诊断标准
主要通过测定血液和组织的 HDV Ag。抗 HDV IgM 和抗 HDV lgG 检测来进行,肝细胞中 HDV Ag 阳性或 HDV RNA 阳性也可确诊。可同时检测血液和组织的 HBV 协助诊断。
(五)HEV 感染的诊断标准
依据戊型病毒性肝炎诊疗规范,抗 HEV IgM 抗体阳性、抗 HEV IgG 抗体阳转或者浓度 4 倍以上升高以及 HEV RNA 阳性这三个指标中符合其一即可作为戊肝诊断的指标,同时满足两项即可确诊,个别情况需动态观察。免疫电镜在粪便中见到 30~32 nm 病毒颗粒亦可确诊,但不作为常规诊断方法。