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PCR疑难解答
当PCR结果不甚满意时,首先检查以下几方面并遵照执行:将PCR反应的试管与反应板紧贴。当酶反应混合物以70℃“热启动”开始循环时,切记在加入酶后稍微振荡一下,因
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影响PCR仪器温度控制性能的因素
一、PCR仪器之间的差别对实验结果的影响。如前所述,没有任何两台PCR仪器的温度控制是一模一样的。相对于预设的温度模块温度总是偏高或偏低,就是同一模块不同的孔之
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PCR技术(八):扩增较大片段DNA的PCR方法
一般PCR方法在扩增大片段DNA时的局限性:通常所用的PCR方法都在两个方面有局限,即目标产物精确程度和合成片段的大小。Pfu(Pyrococcus furio
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PCR--引物设计原则
PCR引物设计原则 PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列。因此,引物的优劣直接关系到PCR的特异性
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PCR常见问题的精辟总结--耶鲁大学
Troubleshooting for PCR and multiplex PCRTroubleshooting discussion is based on
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原位聚合酶链式反应(in situ PCR)和原位反转录
一、仪器设备英国Thermo Hybaid原位PCR仪。二、操作流程(一)原位PCR步骤1、预处理: (1)切片常规脱蜡; (2)0.2mol/L HCl处
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Reverse Ligation Mediated RT -
This procedure was first described by Bertrand et al ( Proceedings of the Nation
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PCR generalities(Components, PCR cycle, vials)
Standard PCR reaction mix Consider the standard PCR reaction mix (25 µL reaction
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PCR技术系列十七:用PCR扩增cDNA库中的特异序列
最常用的基因分离方法需要建立组织或细胞RNA的cDNA库,然后用抗体或 DNA探针筛选出感兴趣的基因。虽然这个方法已成功地克隆了大量基因,但建立和筛 选CDNA
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PCR操作技术—引物设计
Designing PCR primers1.length of individual primers between 18-24 bases. Longer
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PCR技术(十一):PCR片段拼接的SOE和SDL方法
PCR技术(多聚酶链式反应)是现代分子生物学的一个巨大突破,它能在体外迅速、大量、灵敏地扩增基因片段。可是,经PCR技术扩增的大量相关基因片段如何能有效拼接,却
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PCR技术(十):PCR产物克隆方法
平端连接通常情况下,PCR产物可直接与平端载体DNA进行连接,但其连接效 率效低。因为TaqDNA聚合酶具有非模板依赖性末端转移酶活性,能 在两6条DNA链的3
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PCR-SSCP(PCR-single strand conformation polymorphism)
PCR -SSCP(PCR -single strand conformation polymorphism)PCR 是 DNA 的聚合酶链式反应 ,SSCP
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PCR Technology
1.IntroductionPolymerase chain reaction (PCR) has rapidly become one of the most
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增加PCR特异性
一、引物设计细心地进行引物设计是PCR中最重要的一步。理想的引物对只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火。设计糟糕的引物可能会同扩增其他的非目的序列。下面的