Login
欢迎浏览恩派尔生物资料网
我要投稿 请登录 免费注册 安全退出

PCR

  • PCR反应条件如何选择?

    PCR反应条件如何选择?

    PCR反应条件为温度、时间和循环次数。温度与时间的设置:基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法,双链DNA在90~95

  • PCR 扩增常见问题及特点

    PCR 扩增常见问题及特点

    PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚至消失。假阴性,不出现扩增条带。PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备

  • PCR一般步骤

    PCR一般步骤

    (一)总RNA提取取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中,按100g:3ml的比例加入Trizol试剂,严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。 (1)

  • HindIII和Bamh1酶切位点保护碱基的详解

    HindIII和Bamh1酶切位点保护碱基的详解

    用于基因工程的工具酶一,限制性内切酶(Endonucleosase)(一)限制性内切酶(Endonucleosase)的发现与分类1) 50年代初发现细菌能将外

  • 7年分子克隆经验总结

    7年分子克隆经验总结

    做了快7年的分子克隆,从加样加不好,到现在轻松PCR,我想分子生物学这块还是有很多经验可以分享一下的。或许很多人会说分子克隆过程中出现问题最多的大概就是连接了,

  • 巢式PCR(Nested PCR)定义、原理和步骤

    巢式PCR(Nested PCR)定义、原理和步骤

    巢式PCR的定义巢式PCR是一种变异的聚合酶链反应(PCR),使用两对(而非一对)PCR引物扩增完整的片段。第一对PCR引物扩增片段和普通 PCR相似。第二对引

  • Overlap PCR(重叠PCR)的基本原理

    Overlap PCR(重叠PCR)的基本原理

    Overlap PCR(重叠PCR)重叠PCR的应用是非常广泛的,他的原理其实很简单:比如说有两个基因或者说一个启动子和一个基因,你要将他们连接到一 起,我们首

  • RT2 Profiler PCR Arrays新手小技巧及注意事项

    RT2 Profiler PCR Arrays新手小技巧及注意事项

    以下是做了几百次PCR Array的Matt Finley博士的经验之谈:RNA纯化和分析:起始RNA样品的质量是成功实验的最重要的因素之一。我强烈推荐使用QI

  • 转基因大米中Bt基因检测

    转基因大米中Bt基因检测

    2014 年7 月,央视日前报道了湖南、湖北、安徽、福建等4省存在转基因大米的新闻,引发社会极大关注。记者在武汉市一家大型超市,随机购买5种大米。经检测后发现,

  • PCR操作时应注意的事项

    PCR操作时应注意的事项

    PCR检测微量感染因子时,容易因为污染的而导致各种问题,因此,进行PCR操作时,操作人员应该严格遵守一些操作规程,最大程度地降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的

  • 基因组非特异性甲基化水平的研究

    基因组非特异性甲基化水平的研究

    1. 3H―SAM掺入后液闪检测法 (1)将约2 μg 基因组与足量3H标记的SAM,甲基化酶(SssⅠ或HpaⅡ)共同温育,SAM的甲基化基团将被掺人到目的D

  • 差异性甲基化杂交(DMH)

    差异性甲基化杂交(DMH)

    1. 微阵列构建 (1)基因组片段化:将雄性个体(雄性个体包括完整的染色体,即含有Y染色体)基因组DNA经MseI消化(MseI识别位点为TTAA,可以保证富含

  • 甲基化特异性PCR全程易出现的问题与控制措施

    甲基化特异性PCR全程易出现的问题与控制措施

    亚硫酸氢钠修饰DNA的目的是将DNA序列中未甲基化的胞嘧啶完全转化为尿嘧啶,而甲基化的5一甲基胞嘧啶保持不变。影响此过程的主要因素有修饰试剂的浓度、反应温度、反

  • 甲基化PCR检测方法

    甲基化PCR检测方法

    一、基因组DNA的提取此步重点在于DNA的纯度,即减少或避免RNA、蛋白的污染很重要。因此在提取过程中需使用蛋白酶K及RNA酶以去除两者。使用两者的细节:1.

  • BSP/MSP:想说爱你不容易

    BSP/MSP:想说爱你不容易

    甲基化研究做了点甲基化研究,从头下来,也有一点点体会。也看了院子里不少牛人的新的体会。本人将每一个步骤的具体操作、每个操作的具体注意事项和心得进行初步总结,慢慢