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蛋白质与核酸的紫外交联实验-用溴脱氧尿苷(BrdU)取代的探针进行紫外交联
原理含有胸苷卤代物如溴脱氧尿苷(BrdU)的DNA比非取代的DNA对紫外线诱导的 交联更为敏感。本方案中的紫外交联效率是0.1%〜10%,而且在单一复合物中出现
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酵母菌基因组转座子的诱变实验-mTn诱变基因产物的表位标记
材料与仪器mTn诱变酵母菌株pGAL-cre 含有2% (W V)棉籽糖的-Leu -Ura Raff CM缺失成分培养基平板和培养基 含有2% {m V)半乳
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酵母菌基因组转座子的诱变实验-小载体聚合酶链反应
材料与仪器诱变转座子基因组文库质粒DNA锚定囊泡引物1和2 、1 mol L MgCl2、普通小载体(UV)和mTn引物、转座子诱变酵母菌株、合适的限制性内切核
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酵母菌基因组转座子的诱变实验-基本方案
材料与仪器诱变转座子基因组文库质粒DNA10TE缓冲液 pH 8.0 无菌 E. coli tets kans (如 DH5c) 14 cm的LB培养基平板 培
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酵母菌载体与克隆基因表达产物的检测
利用滤纸提取检测法筛选表达β半乳糖苷酶的酵母菌落材料与仪器包含lacZ融合基因的酵母菌株选择培养基平板 液氮 Z缓冲液 20 mg mL-gal溶于二甲基甲酰胺
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放射自显影原位杂交玻片的复染和压片固定实验-甲苯胺蓝染色
材料与仪器水化并显影的原位杂交玻片甲苯胺蓝染液染色盘步骤1)用水稀释甲苯胺蓝染液。按所期望染色程度,凭经验决定稀释度,由1:100稀释 起始。2)玻片在稀释好的
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放射自显影原位杂交玻片的复染和压片固定实验-苏木精/伊红染色
材料与仪器水化并显影的原位杂交玻片苏木精染料(用乙酸处理的Harris改进苏木精 无汞) 0. 1%氢氧化铵 伊红染料玻璃染色盘步骤1) 将显影过的载玻片(在玻
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放射自显影原位杂交玻片的复染和压片固定实验-姆萨 (Giemsa) 染色
材料与仪器水化并显影的原位杂交玻片吉姆萨染色液(Fisher) 710 mmol L磷酸钠缓冲液 pH 6.8 (500 mmol L原液按1:50稀释) 50
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用非同位素探针进行原位杂交和检测实验-地高辛标记探针的信号放大
材料与仪器10μg ml 羊抗地筒辛抗体 Fab 片段 溶于 4SSC 1% m VBSA (组分V) 地高辛信号放大溶液:3. 5〜7. 0 ug ml荧光素
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用非同位素探针进行原位杂交和检测实验-杂交信号的放大
材料与仪器载有样本的载玻片1〜3μg ml生物素酰化抗亲和素抗体 溶于4SSC 1% (m V) BSA (组分 V) 生物素信号放大溶液:含2〜5μg ml荧
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用非同位素探针进行原位杂交和检测实验-荧光原位杂交
材料与仪器载有样本的载玻片 20〜150 ng非同位素标记的DNA探针 去离子的甲酰胺 l0 mg mL经超声处理的鲑精DNA 主杂交混合液 50% (V V)
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细胞凋亡的形态:生化性质实验-吖啶橙或溴化乙锭染色
材料与仪器细胞染液试管步骤1c)将1μL的染色混合液放至12 mm75 mm的玻璃试管的底部。加入25μL细胞悬浮液,用手腕轻柔地混合。2c)将10μL的该混合
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细胞凋亡的形态:生化性质实验-吖啶橙染色
材料与仪器细胞染液试管步骤1b)将1μL的染色混合液放至12 mm75 mm的玻璃试管的底部。加入25μL细胞悬浮液,转动手腕轻柔地混合。2b)将10μL的该混
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细胞凋亡的形态:生化性质实验-使用活体荧光染料的显微镜定量凋亡指数和细胞活力(台盼蓝染色)
材料与仪器细胞染料混合物:0.01%台盼蓝 l00μg ml吖啶橙 或 100μg ml吖啶橙+100 μg ml溴化乙锭 所有试剂都在PBS中制备 约5105
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β-半乳糖苷酶活性的整体封片免疫组化检测实验-准备大组织的厚切片进行β-半乳糖苷酶染色
材料与仪器小鼠或鸡的整个胚胎、组织或外植体4%(m V)琼脂糖 氰基丙烯酸盐黏合剂(如Superglue) l00 mmol L磷酸钠盐缓冲液 pH 8.0振动