植物组织中酷类物质含量的测定

植物组织中的酚类物质在多酚氧化酶的催化下被氧化为醍，醍可自动聚合成有 色物质，发生褐变。因此，对植物组织内酚类物质进行定量测定具有一定意义，是植物抗性生 理研究中经常用到的一个指标。本实验的目的在于学习测定酚类物质含量的原理及方法。

原理

酚类物质含量测定常采用 Folin-酚法。酚类物质在碱性条件下可与 Folin-酚试 剂中的磷鸨酸和磷钥酸反应生成鸨蓝和钥蓝化合物，该物质在 700 nm 处有最大光吸收，其吸 光度的大小与酚类物质的含量成正比。因此，通过测定吸光度的大小即可测定植物组织中酚 类物质的含量。

材料与仪器

1. 材料：各种植物组织。

2. 试剂：

(1)Folin-酚试剂：称取鸨酸钠 25 g 和磷铝酸 5 g, 放入回流瓶中，加 12.5 mL 磷酸和 188 mL 蒸馋水，一起回流煮沸 2 h, 冷却后用蒸僭水定容至 1 000 mL。

(2)10% Na2CC)3：称取 10 g Na2CO3 溶于 100 mL 蒸儒水中。

(3) 标准酚溶液：0.45 mmol - 邻苯二酚溶液。

3. 仪器: 分光光度计，离心机，研钵，试管，试管架，移液管等。

步骤

1 . 酚类物质的提取：称取 1 g 植物材料，加少量水研磨成匀浆，充分洗涤研钵，定容至 100 mL。用时可适当稀释。

2. 标准曲线的制作：按表 56」加入各种试剂，混匀，3 min 后加 10% Na2CO3 2 mL, 振 摇，室温下静置 1 h 后测定其在 700 nm 处的吸光度。以酚溶液浓度为横坐标，吸光度为纵坐 标，绘制标准曲线。

表 56-1 标准曲线制作加样表

3. 样品酚含量的测定：将提取液适当稀释，吸取 2 mL 置于试管中，加 2 mL Folin-酚试 剂，3 min 后加 10% Na2CO3 2 mL, 振摇，室温下静置 1 h 后测定其在 700 nm 处的吸光度，在 标准曲线上查出对应的酚浓度厂

4. 结果计算：

c X V

酚含量 (Mmol- g-,) = —

式中：c 一为从标准曲线上查得的酚浓度，卩 mol・mL 1；

V—为样品体积,mL；

W —为样品质量»go

注意事项

酚类物质提取时避免被氧化。

常见问题

测定植物组织中酚类物质的含量有何意义？