肝脏灌流实验

肝脏灌流实验，保留了完整细胞和组织结构的基础，可以极大提高药物研发的效率。

原理

肝脏灌流实验的基本原理是在麻醉状态下用外科手术使肝脏形成体外循环，由蠕动泵将含有低分子量葡萄糖、并用氧气与二氧化碳 （955） 气体饱和的 Krebs－Henseleit 或 Krebs－Ringer 溶液恒速泵入循环管道，流经过滤装置、加温装置、门静脉套管、肝，最后从上腔静脉或下腔静脉流出、流出液可取样进行分析或再流回贮液池进行再循环，使肝脏能在一段时间内维持其正常的生理和生化功能。

用途

肝脏灌流实验可用于动态地研究化学异物在肝脏中的代谢变化及其对肝功能的影响。

材料与仪器

器材：灌流装置；恒温循环系统、灌流液循环系统和气体交换系统；手术器械。

实验动物：200－250 g 大鼠

步骤

肝脏灌流实验的操作方法如下：

A、大鼠腹腔注射戊巴比妥钠 50 mg/kg 麻醉后，仰放在手术台上。

B、腹腔 U 形剪开，将腹腔内脏器移向躯体左侧，暴露胆管和肝门静脉。

C、分离胆管、插入胆管导管、固定。

D、分离门静脉、结扎肝脾分支，在门静脉近肝端与幽门静脉分支之间穿入手术丝线并打活套，做门静脉插管，迅速固定后开始灌流。

E、剪断下腔静脉腹腔段，迅速打开胸腔，在靠横膈一侧剪断下腔静脉胸腔段，冲去肝内残血。

F、将肝脏完整无损地分离出来，转移到灌流仪的脏器托盘上，或置于原位。

G、用预温 37 ℃ 的灌流介质冲洗肝内残存血液。

H、用不含红细胞等添加剂及受试药物的灌流介质平衡肝脏 10~20 分钟，然后换至含有受试药物及其他添加剂的灌流介质，调整灌流速度。