动物体内转染常见问题与解决方案

Entranster^TM-in vivo体内转染试剂通过纳米技术合成，通过物理作用与核酸结合，浓缩包裹核酸，从而保护核酸免受免疫系统破坏，同时增强核酸进入细胞核中表达。不含任何动物来源成分，由于处于纳米尺度，粒径小，不易引起免疫反应，不影响动物和器官组织的功能，可以多次在同一动物注射。

一般情况下，核酸$\mathrm{<span\; style="font-size:\; 16px;">\mu </span>}\mathrm{<span\; style="font-size:\; 16px;">g</span>}$和EntransterTM-in vivo $\mathrm{<span\; style="font-size:\; 16px;">\mu </span>}\mathrm{<span\; style="font-size:\; 16px;">l</span>}$按照1:2的比例使用。通过尾静脉注射或局部注射，在动物体内发挥全身或局部的作用。一般来说，根据注射方法和靶器官的差异，12-48小时后基因表达效果较好。一次给药检测的最佳时间是注射后12-48小时。如果需要维持长期效果，可以采用多次注射的方法，注射频度一般为每间隔2-3天一次，也可以根据实验情况适当延长至每7天一次。

常见问题与解决方案

1. 转染复合物出现沉淀

• 核酸用TE等溶解：核酸用适量无内毒素纯水稀释成1μg/μl$\mathrm{<span\; style="font-size:\; 16px;">如</span>}\mathrm{<span\; style="font-size:\; 16px;">核</span>}\mathrm{<span\; style="font-size:\; 16px;">酸</span>}\mathrm{<span\; style="font-size:\; 16px;">原</span>}\mathrm{<span\; style="font-size:\; 16px;">液</span>}\mathrm{<span\; style="font-size:\; 16px;">浓</span>}\mathrm{<span\; style="font-size:\; 16px;">度</span>}\mathrm{<span\; style="font-size:\; 16px;">小</span>}\mathrm{<span\; style="font-size:\; 16px;">，</span>}\mathrm{<span\; style="font-size:\; 16px;">注</span>}\mathrm{<span\; style="font-size:\; 16px;">射</span>}\mathrm{<span\; style="font-size:\; 16px;">体</span>}\mathrm{<span\; style="font-size:\; 16px;">积</span>}\mathrm{<span\; style="font-size:\; 16px;">会</span>}\mathrm{<span\; style="font-size:\; 16px;">增</span>}\mathrm{<span\; style="font-size:\; 16px;">大</span>}$

• 注射时的核酸终浓度过高：注射时的核酸终浓度<=0.5μg/μl

• 转染复合物被冻存或低温放置时间过长：转染复合物最好即配即用

2. 转染水平低

给药剂量低：在不造成动物死亡前提下，提高给药剂量

3. 动物有炎性反应或死亡

• 注射操作有误 ：将药液正确注射到相应部位

• 核酸用量过大：降低核酸用量，保持核酸和转染试剂比例，同步降低转染试剂用量。

• 注射液中含内毒素：采用无内毒素的核酸，注射前，采用22μm滤器过滤除菌