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GST-puiidown和coip有何区别?

2025-01-23 细胞技术 加入收藏
GST pull-down和co-immunoprecipitation(co-IP)都是目前常用的蛋白质交互作用检测方法,它们的区别在于: 1. G

 GST pull-down和co-immunoprecipitation(co-IP)都是目前常用的蛋白质交互作用检测方法,它们的区别在于:

     1. GST pull-down通常用来检测大量的非特异性蛋白质与目标蛋白相互作用。GST是一种载体蛋白,可以通过将其连接到表达靶蛋白上,在混合物中捕获与该靶蛋白有相互作用的其他蛋白质。之后,利用GST标记的固定矩阵,用于分离以GST为基础的复合物。而CO-IP则主要用于检测两个或多个具有特异性结合关系的重要蛋白质的交互。通常使用一种抗体将其中一个蛋白质沉淀下来形成复合物,再使用其它方法分离所形成的复合物

    2. GST pull-down可检测到利用啮齿动物细胞从组织中获得的细胞匀浆等,而CO-IP主要是进行蛋白免疫染色实验,并且其灵敏度也更高。

    3. CO-IP通常只能采用单个抗体,用于检测特定的 相互作用 ,而GST pull-down使用基础载体蛋白质的普遍性使其不局限于特定的相互作用关系

    4. GST pull-down技术虽然是一种较为简单,快速、经济的筛查方法,但受到靶蛋白选择性和专一性影响较大,需要根据实验需求进行配合与补充

    综上所述,GST pull-down适用于快速筛查靶蛋白的交互作用,并且通常会引导复杂的分析 。而CO-IP可以更加精确地分析两种特定蛋白之间的相互作用,对于分析协同作用非常方便。


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