肝纤维化动物造模步骤下篇

一、胆管结扎诱导肝纤维化动物模型

1、实验准备

雄性C57，BALB/c小鼠（10周龄左右）或雄性SD大鼠（200g左右）。器械：扩创钩，镊子，尖头剪刀，持针钳，圆针、角针，钝性剪刀，刀柄，创巾，棉签，剃毛刀，酒精棉球，碘伏，注射器，缝合线（3号）

2、胆管结扎操作步骤

（1）术前麻醉，固定；

（2）术部剃毛，擦碘伏，75%酒精脱碘，铺创巾；

（3）沿腹中线剪开皮肤，钝性剪刀分离皮下的脂肪和肌肉；

（4）皮肤上开到尖状软骨处，拉牵引线，生理盐水冲洗腹腔，扩创钩使皮肤两侧撑开；

（5）棉签沾生理盐水拨开肝脏、肠、胰等脏器，在肝脏底部寻找并暴露出胆管（大鼠没有胆囊，在肝脏和十二指肠中间找，小鼠沿着胆囊和十二指肠找），胆管下可看到门静脉血管，与门静脉血管平行的透明黄色的为胆管。

（6）用镊子拨开胆管覆盖及周边的脂肪(一定要剥离干净周边的脂肪，否则容易造成结扎线滑脱)，找到后把镊子伸到胆管下方拨开脂肪，丝线穿过镊子，在胆管处打结，可扎2道防止造模不成功，生理盐水冲洗腹腔。

（7）将内脏归位，先把腹膜缝在一起，然后再将皮肤缝合。

（8）每天碘伏消毒，75%酒精亦可。

（9）对照组与结扎组操作一致，仅不扎线。

3、注意事项

（1）手术无菌操作，动物注意保温。

（2）尽量缩短操作时间。

（3）手术操作后注意动物创口感染。

二、营养性肝纤维化

1、实验动物、材料准备

实验动物：150-200g左右的SD大鼠。

实验材料：高脂、高胆碱、低蛋白饲料或低蛋白、低蛋氨酸、加乙硫氨酸饲料。

2、实验方法

每周更换两次特种饲料，持续8周以上。

PS：此方法造模耗时长，成模率低，一般用于非酒精性脂肪肝病研究。