细胞增殖检测方法汇总

细胞增殖检测法（一）：直接计数法

这是一种非常简单的检测方法，我们可以利用计数板或技术仪得出细胞数目然后对数目进行比较即可。其缺点是不适合评估特定亚群、和数量较多的细胞计数。

细胞增殖检测法（二）：直接Brdu/EdU检测法

Brdu中文全名5-溴脱氧尿嘧啶核苷，为胸腺嘧啶的衍生物，可代替胸腺嘧啶在DNA合成期（S期），活体注射或细胞培养加入，而后利用抗Brdu单克隆抗体，ICC染色，显示增殖细胞。同时结合其它细胞标记物，双重染色，可判断增殖细胞的种类，增殖速度，对研究细胞动力学有重要意义。

细胞增殖检测法（三）：直接MTT检测法

MTT检测法主要反映细胞的能量代谢，是检测细胞增殖活力的一种简便准确的方法，其原理是在活细胞生长和增殖过程中，线粒体内的脱氢酶可将黄色的MTT分解成兰紫色的甲（Formazan），生成的甲瓒的多少与细胞的数量和细胞的活力成正比。

细胞增殖检测法（四）：CCK-8检测法

CCK-8就是MTT的升级版，CCK-8细胞活性检测试剂中含有WST-8——一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以为线粒体内的脱氢酶验明正身，在脱氢酶作用下，还原生成橙黄色的甲瓒产物。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。

细胞增殖检测法（五）：直接3H-TdR渗入法

胸腺嘧啶核苷（TdR）是DNA特有的碱基，也是DNA合成的必需物质。用同位素3H标记TdR即3H-TdR作为DNA合成的前体能掺入DNA合成代谢过程，那之后的每一条新合成的DNA双链像被安装了GPS定位器一样，都能被液体闪烁计数器检测到，通过测定细胞的放射性强度，可以反映细胞DNA的代谢及细胞增殖情况。优点：3H-TdR掺入法敏感性高，客观性强，重复性好。缺点：需一定设备条件：液体闪烁计数器，这玩意不便宜，同时还存在放射性核素污染问题，真是伤钱包又伤身体。

细胞增殖检测法（六）：核抗原Ki‐67染色法

Ki-67染色，研究人员可以评估处于细胞周期所有活跃期的总增殖细胞的百分比。科研人员可以借此观察药物或未知化合物的刺激效应或抗增殖效应。可用免疫组织化学技术或流式细胞术检测。

细胞增殖检测法（七）：CFSE检测法

羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）是一种可穿透细胞膜的荧光染料，可以不可逆地与细胞内的氨基结合偶联到细胞蛋白质上，是一种良好的细胞标记物。其检测法原理：CFSE进入细胞后，可以不可逆地与细胞内的氨基结合偶联到细胞蛋白质上。当细胞分裂时，CFSE标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，因此其荧光强度是在亲代细胞的一个增殖的细胞群中，各连续代细胞的荧光强度呈对递减，利用流式细胞仪在488nm激发光和荧光检测通道可对其进行分析。