修复突出的3’或5‘末端(大肠杆菌 DNA 聚合酶 Ⅰ Klenow 片段实验)
材料与仪器DNA限制性内切酶 EDTA水浴锅步骤1. 在20 μl 反应体积中,用限制性内切酶消化0.1~4 μg DNA。2. 加入1 μl 0.5 mm
材料与仪器
DNA
限制性内切酶 EDTA
水浴锅
限制性内切酶 EDTA
水浴锅
步骤
1. 在20 μl 反应体积中,用限制性内切酶消化0.1~4 μg DNA。
2. 加入1 μl 0.5 mmol/l 含各种dNTP的混合液,并加入1~50 U 的klenow酶,30℃温育15 min。
3. 75℃加热10 min或者加入1 μl 0.5mol/l EDTA以终止反应。
2. 加入1 μl 0.5 mmol/l 含各种dNTP的混合液,并加入1~50 U 的klenow酶,30℃温育15 min。
3. 75℃加热10 min或者加入1 μl 0.5mol/l EDTA以终止反应。