细胞周期的DNA检测

Ⅰ、样品准备　准备以下一种或几种样品 A、组织单细胞悬浮液（如淋巴腺、脾、骨髓、胎盘细胞） B、组织培养细胞 C、Ficoll-hypaque分离的单核细胞 Ⅱ、反应体系－DNA低渗缓冲液 柠檬酸三钠 　 　　0.25g Triton-X 100 0.75ml Propidium iodide 0.025g 核糖核酸酶　　　　 　0.005g 蒸馏水　　　　　　　　250ml 我们将该DNA低渗溶液于密闭瓶子中存放数月后并无发现有任何染色活性的丢失 Ⅲ、染色 1、 每一个管子中放入1×106个细胞； 2、 样品离心后尽可能完全地移去上清液，并且不要打碎沉淀块； 3、 入1ml的DNA低渗染色缓冲液至沉淀中，并混匀； 4、 样品于4℃下避光30分钟或最长不超过1个小时以备流式细胞仪分析。 注意：延长在低渗缓冲液的曝光时间会引起样品碎片的增加。