细胞膜的凋亡检测的基础原理
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在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜 脂质双层的内侧,细胞发生凋亡早期,膜磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。
在细胞发生凋亡时,膜磷脂酰丝氨酸外翻的发生早于细胞核 的变化,而此阶段Propidium Iodide(PI)不能通过细胞膜。
细胞坏死 时,虽然也会发生磷脂酰丝氨酸外翻,但此时细胞膜的通透性明显增加,PI等核酸染料进入细胞与细胞核中的核酸结合,发出红色荧光。所以Annexin V-FITC(绿色荧光)常与鉴定细胞死活的核酸染料(如PI)合并使用,来区分凋亡细胞与死亡细胞。