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生物化学

直接裂解法提取制备模板核酸

2025-03-31 生物化学 加入收藏
标本(组织细胞,分泌物)加PBS或生理盐水离心洗涤后,加消化 裂解液20~50ul(0.5%NP-40和0.5%吐温-20),95~98℃,15~30min以裂

标本(组织细胞,分泌物)加PBS或生理盐水离心洗涤后,加消化 裂解液20~50ul(0.5%NP-40和0.5%吐温-20),95~98℃,15~30min以裂解病原体, 裂解细胞.然后12000r/min离心5~10min,取上清20~30ul用于PCR扩增.血清标本可 直加等体积的消化液,加热处理离心后PCR扩增.亦有用5%的NP-40和1.5%2-ME做裂解 液,95℃30min消化处理,离心取上清,PCR扩增检测HBV DNA.

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