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生物化学

电泳技术[Techniques in Electrophoresis]

2025-04-03 生物化学 加入收藏
目前电泳技术已被广泛应用于蛋白质、核酸和氨基酸等物质的分离和鉴定。 何谓电泳?在溶液中,带电粒子在外加电场的作用下,向相反电极方向移动的现象,称为电泳。 电泳时

目前电泳技术已被广泛应用于蛋白质、核酸和氨基酸等物质的分离和鉴定。 何谓电泳?在溶液中,带电粒子在外加电场的作用下,向相反电极方向移动的现象,称为电泳。 电泳时不同的带电粒子在同一电场中泳动速度不同。电泳速度常用泳动率(M)来表示。 泳动率也称迁移率。 它等于泳动速度(V)与电场强度(E)之比(1式),亦即带电粒子在单位电场强度下的泳动速度称泳动率。 在式(2)中,L为泳动距离,t 为通电时间;在式3中,V为加在支持物两端的端电压,d为支持物的有效长度。 将式2和式3代入式1得: 由式4可知,当d、L、V及t等数值为已知时(实验测得),可以计算求得泳动率M的值。 二、影响泳动率的因素 根据物理学原理,带电粒子在电场中所受电场力(F)等于电场强度与粒子所带电量的乘积 F=E Q (5) 在上式中,E为电场强度,Q为粒子所带电量。 又据Stokes定律,一个球形分子在溶液中泳动时,受到的阻力(F/)与球形分子的半径(r)、溶液的粘度(η)及泳动速度(v)成正比,其比例系数为6π。即: F‵=6πrηv (6) 当带电粒子所受的电场力F与阻力F/相等时,即F= F/,就有 E Q = 6πrηv (7) 7式两端同时除6πrηE,得:

V

 

 

=

Q

( 8 )

E

6πrη



由式7和8可得 由上式可见,泳动率与球形分子所带电荷电量成正比,与球形分子的大小及介质粘度成反比。泳动率除受上述自身性质及介质粘度的影响外,还受其他外界因素的影响。


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