用T4连接酶实现10分钟快速TA克隆的新方法

目前市场上常见的TA克隆试剂盒，根据连接方法可以分成两种：

方法1：

以T4连接酶进行连接的方法，这两种方法转化子比较多，阳性率也不错，唯一的不足就是连接的时间长。因为连接时间越长效率越高，一般快速连接方法需要半个小时到一个小时；达到最佳的效果，要过夜连接。

方法2：

以拓扑异构酶（TOPO）进行连接的方法，这种方法的优势是快速连接，在5-15分钟就可以将目的基因克隆到载体中，阳性率比较高，这种方法国内也有人模仿。这种方法虽然速度快，但是也有一些缺陷，比如长片段连接效率不如T4连接酶，转化子少，TOPO酶对温度很敏感，稳定性较差。

百泰克公司新近又推出了一款用T4连接酶进行10-15分钟快速TA克隆的试剂盒，不仅能够继承T4连接酶连接的优点，而且能够达到10分钟快速克隆的要求，大大的节省了实验的时间，提升了效率。

该试剂盒的连接酶仍然是T4连接酶，但是连接的体系为百泰克自主开发的新技术，能促进片段快速连接，该体系也可以用在其他TA克隆载体的快速连接。