从普通琼脂糖凝胶电泳中用玻璃奶回收DNA段

实验步骤：

1、待回收的DNA段经电泳分离后，从琼脂糖凝胶上切下所需DNA段，放在1.5ml EP管中；

2、加入3 倍（请准确估量凝胶的体积）体积的溶胶液（以100μl 体积胶加入300μl 溶胶液为一次标准反应），室温下放置5分钟或50℃ 保温3分钟，其间轻摇EP管几次使胶完全融化；

3、加入10μl玻璃奶（玻璃奶使用前请充分摇匀），颠倒混匀，冰浴下放置10分钟。每隔2~3分钟混匀一次，12000rpm离心30秒，吸弃上清；

4、加250μl漂洗液（浓缩漂洗液使用前，按浓缩漂洗液：无水乙醇= 3：7配制成工作浓度），用加样器吹打漂洗液，轻柔地将玻璃奶悬浮混匀，12000rpm离心30 秒，吸弃上清；

5、重复步骤4（尽量吸尽漂洗液）。吸取完漂洗液后再离心10秒钟，用Tip头将最后一点儿漂洗液吸干净。然后，放置于37℃烘箱干燥直至沉淀呈白色，约15~20分钟；

6、加适量洗脱缓冲液即无菌水（20μl为一次标准反应），混匀，60℃水浴5分钟，12000rpm离心1分钟，回收上清备用。重复步骤6，能提高回收率。

7、同原质粒一起琼脂糖凝胶电泳鉴定回收片段。根据亮度可以估计回收的量。