RNA干扰分子的制作

摘　要：小干扰RNA是一种能够在各种生物体和细胞(包括蠕虫、果蝇、植物、哺乳动物)中减弱基因表达的有效工具。在哺乳动物中转染的siRNA能够抑制特殊基因的表达，这已经证明是探索基因功能、基因敲除、抗病毒研究、基因治疗的有效方法。简单、有效、特异性地抑制基因的表达具有巨大的科学、商业和医学治疗价值。如何设计和制作siRNA是影响RNA干扰效率的一个很重要的方面。本文就siRNA的设计和制作等方面作扼要的介绍。 关键词：T7启动子；小干扰RNA；小发夹RNA；小干扰RNA表达框；U6聚合酶III启动 荀恒杰，于源华*，蔡林君 (长春理工大学生物工程系，长春 130022) RNA 干扰，也称为转录后基因沉默，是双链RNA (double-stranded RNA, dsRNA)分子阻断或者降低同源基因表达的现象。1998 年华盛顿卡耐基研究院的Andrew Fire 和马萨诸塞大学癌症中心的Craig Mello 证实，1995 年Su Guo 博士在线虫中发现的正义RNA 和反义RNA 都能够特异性地阻断基因的表达，其实是dsRNA 阻断整个线虫的同源基因表达，并且把这种现象称为RNA 干扰(RNA interference，RNAi)。从此，RNA 干扰成为热门领域，相关科学论文及报道爆炸性增长。RNAi 沉默机制主要体现在抗病毒、基因调控、染色质浓缩、转座子沉默、基因组重组等领域，它主要用于高通量的基因功能研究、基因敲除、基因治疗及药物筛选探索等方面。而沉默机制和应用方面的研究都离不开如何设计以及制作特异性的高效RNA 干扰分子。 全文： RNA干扰分子的制作.PDF