血浆蛋白质测定

临床生化检验中测定蛋白质的方法很多，主要利用蛋白质的分子组成，结构或性质进行。 一、测定蛋白质特征元素 —— 氮    如凯氏定氮法，是测定蛋白质的经典方法，1883年Kjeldahl首创，精密度准确度高，但操作复杂、费时、技术性强，不适合临床常规检测，一般用于标准血清的标定和校正。 二、利用重复的肽链结构    如双缩脲法，1914年首创，操作简便，重复性好，各种蛋白产生的颜色反应相近，但灵敏度较低，是目前临床上测定总蛋白的常规方法。 三、利用酪氨酸、色氨酸残基与 试剂 的反应或紫外吸收    如： 1. 酚 试剂 法   1921年，Folim首创，后又经改进，1951年Lowry改良成今法、灵敏度高（较双缩脲法高100倍），主要用于微量蛋白质检测，但各种蛋白质中酪氨酸含量不一，故准确性较差，试剂配制复杂且不稳定，化学干扰多，目前临床上仅用于粘蛋白测定。 2. 紫外吸收法   在280nm处有一吸收峰，快速、简单，不需加任何试剂，保留蛋白质活性，化学干扰大。 四、利用与染料的结合能力 1. 考马克斯亮蓝G-250结合蛋白法（CBB法）   1976年Bradford应用于蛋白质测定，操作简便、快速、重复性好，灵敏度高，干扰因素少，但特异性不高，大分子肽（分子量300以上），也参与反应，线性范围窄，临床上主要用于尿、脑溶液蛋白质测定。 2. 溴甲酚绿结合清蛋白法（BCG法）   灵敏度高， 血清 用量少，操作简便，但特异性不高，部分球蛋白也能与之结合（ α 1 -球蛋白、运铁蛋白、触珠蛋白等），是目前临床上测定清蛋白的常规方法。 五、利用沉淀后借浊度或光折射测定    如比浊法、折光测定法，方法简便，试剂易得，但浊度的强弱受反应的条件影响大（加试剂的方法、温度等），结果准确性差，一般用于尿、脑脊液蛋白测定。 六、电泳法    CAE、PAGE，目前临床上常用电泳技术，但只能计算各种蛋白质百分含量。 七、利用免疫学特性    免疫化学法，特异性、灵敏度高，只能用于某种特异蛋白的测定。