为什么浓缩胶对蛋白质有浓缩作用?
一、浓缩胶浓度为5%,孔径较大,使胶体不具有分子筛效应。二、SDS-PAGE胶采用不连续胶体系统,利用上下胶不同PH与浓度差异产生不同效应。电泳缓冲液中Gly的
一、
浓缩胶浓度为5%,孔径较大,使胶体不具有分子筛效应。
二、
SDS-PAGE胶采用不连续胶体系统,利用上下胶不同PH与浓度差异产生不同效应。
电泳缓冲液中Gly的PI(等电点)为5.97,电泳缓冲液PH为8.3,Gly在PH8.3的环境中带负电,Gly会向正极移动进去上胶。
因浓缩胶PH为6.8,Gly进入上胶后又几乎不带电移动缓慢,而胶中HCL解离出氯离子,体积小,又带强负电,移动快,迫使蛋白进入上胶并居中(形成低电导区)
所以浓缩胶具有浓缩作用(纯粹个人理解)