DC2.4细胞
DC2.4细胞1.这个好养吗,有什么特别需要注意的地方吗?养活很容易,但是要保持其不成熟的状态不容易。2.它的表面标记是什么?CD86高表达,CD80CD83L
DC2.4细胞
1.这个好养吗,有什么特别需要注意的地方吗?
养活很容易,但是要保持其不成熟的状态不容易。
2.它的表面标记是什么?
CD86高表达,CD80CD83LPS刺激后高表达,MHCII低表达。
3.和人外周血或小鼠骨髓分离出来的单核细胞刺激生成的DC的主要区别有哪几个方面?
优点:方便
缺点:刺激T细胞增殖的能力很弱。
4.用于免疫方面的研究的话可以用DC2.4替代吗?
分子免疫和细胞免疫,可以。
5.还有有人知道哪里可以买到吗?
宁波明舟生物科技有限公司
6.实验室培养经验
DC2.4对胰酶浓度 体积没有要求,按自己正常消化步骤。消化一定要注意控制胰酶作用时间,胰酶消化是需要比较精细的操作,既要充分消化下细胞打散成单细胞悬液,均匀接种,又要避免消化过度造成细胞严重受损 。
每个客户用的胰酶活力及消化步骤、试剂都是不一样的,不能完全规定消化时间,以客户经验为准。 对于消化这步,客户如果对该细胞经验不多,无法准确掌控胰酶作用时间
建议客户按照下述操作:胰酶首先复温到室温后加入细胞,放入37度培养箱,然后每隔30秒,即吹打下细胞,如果能够吹打散细胞,加入完全培养基终止消化,如果30秒吹打不下,再等30秒重复操作。
消化完成后加6-8ML完全培养基终止消化,混匀细胞,收集细胞悬液900-1000rpm离心3min,弃上清。再加5ml PBS重悬细胞,再离心后,用完全培养基重悬接种到新的培养皿。
第二次PBS重悬是为了去除碎片,如果平时碎片比较少,传代时可以省略PBS重悬的步骤;如果碎片很多,建议PBS多洗一次。同时客户要确认细胞培养使用的血清质量是否正常,完全培养基的PH值是否7.4左右 。
冻存液配方看说明书。
具体操作与大部分细胞一样,没有什么需要特殊注意的。