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生物化学

异构酶的测定实验-葡萄糖异构酶微板测定

2024-12-07 生物化学 加入收藏
材料与仪器酶溶液TES NaOH D-葡萄糖 间苯二酚 FeNH4(SO4)2·12H2O微孔板读数仪步骤实验所需「试剂」具体见「其他」测定步骤与木糖苷基本相同

材料与仪器

酶溶液
TES NaOH D-葡萄糖 间苯二酚 FeNH4(SO4)2·12H2O
微孔板读数仪

步骤

实验所需「试剂」具体见「其他」

测定步骤与木糖苷基本相同,唯一不同的是在 490 nm 处测定吸光值。

注意事项

常见问题

试剂:

0.2 mol/L TES/NaOH,pH 8.0[N-tris(羟甲基)-甲基-2-氨甲基酸,Mr=229.3;9.2 g 溶于 100 ml 水中,用 1 mol/L NaOH 调节至 pH 8.0,用水加至 200 ml]

2.0 mol/L D-葡萄糖(Mr=180.2;7.2 g 溶于 20 ml 水中)

0.03 mol/L CoCl2(含六分子水,Mr=237.9;71 mg 溶于 10 ml 水中)

溶液 A:0.05% 间苯二酚(Mr=110.1;50 mg 溶于 100 ml 乙醇)

溶液 B:FeNH4(SO4)2·12H2O(Mr=482.2)216 mg 溶于 1 L 浓 HCl

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