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生物化学

脂肪酶的测定实验-荧光分析法

2024-12-07 生物化学 加入收藏
原理此实验同样适用于胰凝乳蛋白、胆碱酯酶和酰基转移酶。可以用作底物的并非只是联丁酰荧光素,乙酰胆碱酯酶荧光素亦可。联丁酰荧光素 荧光素(无荧光性) (有荧光性

原理

此实验同样适用于胰凝乳蛋白、胆碱酯酶和酰基转移酶。可以用作底物的并非只是联丁酰荧光素,乙酰胆碱酯酶荧光素亦可。

联丁酰荧光素 → 荧光素

(无荧光性) (有荧光性)

材料与仪器

酶样品
Tris-HCl 联丁酰荧光素
荧光光度计

步骤

0.1 mol/L Tris-HCl,pH 8.0

0.05 mmol/L 联丁酰荧光素 [Mr=472.5;溶解 2.36 g 于 5 ml 乙烯基乙二醇一甲醚(甲基溶纤剂)中,95 ml 0.1 mol/L Tris-HCl pH 8.0 作为底物溶液]

配成 2.9 ml 底物溶液需用 0.1 ml 底物样品。在 470 nm 激发,于 510 nm 处测量到荧光。

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