L-乳酸脱氢酶测定实验-荧光光度计法测定还原反应

步骤

实验所需「试剂」具体见「其他」

1.98 ml 实验混合物

0.02 ml LDH 稀释溶液

25℃ 时，在 260 nm 激发，470 nm 处测定每分钟荧光差异。用适当浓度范围的 NADH 浓度对荧光强度的标准曲线来确定比例因子。

计算

体积活性：

特殊活性：

常见问题

试剂：

0.1 mol/l 磷酸钾 pH 7.0

0.01 mol/l NADH（71 mg 溶于10 ml H2O 中）

0.1mol/l 丙酮酸（丙酮酸钠，Mr＝110；110 mg溶于10 ml H2O 中）。

LDH 原料溶液（从猪心脏提取，例如 10 mg/ml，用 0.1 mol/l 磷酸钾 pH 7.0 稀释至 1 IU/ml）