β-半乳糖苷酶活性的整体封片免疫组化检测实验-准备大组织的厚切片进行β-半乳糖苷酶染色

小鼠或鸡的整个胚胎、组织或外植体
4%（m V)琼脂糖 氰基丙烯酸盐黏合剂（如Superglue) l00 mmol L磷酸钠盐缓冲液 pH 8.0
振动切片机（如VT 1000S; Leica)

步骤

1) 固定和洗涤组织。

2) 将组织放置在100 mL烧杯中，用吸管轻柔吸取大部分的洗涤缓冲液。在37〜40℃加入足够的4%中等强度的琼脂糖覆盖组织（让烧杯倾向于组织这边）。旋动烧杯混匀并使充分覆盖组织。

3) 室温将烧杯放置成45°角直到琼脂糖变硬（约10 min)。

4) 用一刀片调整琼脂糖块使之成方形，每边留出2〜3 mm。

5) 用氰基丙烯酸盐粘合剂在合适的方向（如冠状切面）粘住琼脂糖块，使之粘到振动切 片机的标本支持机托盘上。将该托盘放进振动切片机，给整个槽装满100 mmol/L的 磷酸钠盐缓冲液，pH 8.0。

6) 切片 (细节参考振动切片机手册）。小心地从振动切片机槽内移走切片，放 入β-半乳糖苷酶洗涤缓冲液直到准备染色。进行组织染色。

7) 观察和摄影染色的厚切片