诱发性糖尿病动物模型-链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病模型

链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病模型，链脲佐菌素(streptozotocin, STZ) 是一种广谱抗生素，具有抗菌、抗肿瘤和致糖尿病的副作用，进入体内通过自由基损伤B 细胞，使B 细胞功能受损，胰岛素合成减少，引发糖尿病。

STZ 是目前使用最广泛的糖尿病动物模型化学诱导剂，它对一些种属的动物胰岛B 细胞有选择的破坏、可以使猴、犬、羊、兔、大鼠、小鼠等实验动物产生糖尿病，常用大鼠造模。

材料与仪器

器材：

全价营养颗粒料和青饲料、注射器、采血针等。

试剂：

①枸橼酸－枸橼酸钠缓冲液 ;

②STZ ;

③枸橼酸缓冲液。

步骤

（一）大剂量STZ注射法：

A. 大鼠： Wistar 大鼠禁食10小时，将用STZ 溶于0.1 mol/L 枸橼酸－枸橼酸钠缓冲液(pH4.5, 4 °C), 配成1.0% 溶液．按50 mg/kg 单次腹腔注射。

5 天后尾静脉血糖≥16.7 mmol/L 为成模标准。朱向红等选用2天龄雄性Wistar 大鼠，STZ 溶于0.1 mol/L 枸橼酸－枸橼酸钠缓冲液(pH4.4，4 °C） 按90 mg/kg剂量一次性给药，继续饲养至第10 周，成模率约90% 。

B. 小鼠： 6~8 周C57BL/6J 小鼠，禁食12 小时后， 一次性腹腔注射STZ 100 mg/kg (0.1 mol/L 枸橼酸钠稀释，pH4.5), 1周后空腹血糖≥16.7 mmol/L 作为成模标准。用于制备1型糖尿病动物模型。

C. 食蟹猴：雄性成年食蟹猴，禁食16小时后一次性静脉注射STZ( 临用前用0.1 lmmol/L 、pH 4.2-4.5的枸橼酸缓冲液配成10 mg/L）， 剂量为45 mg/kg, 继续饲养7 周， 猴糖尿病的诊断标准为：

①空腹血糖≥8.0 mmol/L 且持续3 周以上（空腹指至少8小时未进食）；

②葡萄糖耐量试验中，葡萄糖负荷后2小时血糖≥10.9 mmol/L。 具有以上2条之一皆可视为动物已患有糖尿病，同时结合C 肽下降、GAD-Ab 阳性为I型糖尿病模型。

D. 恒河猴： 5年龄恒河猴，饲喂全价营养颗粒料和青饲料、枸橼酸缓冲液(pH 4.3) 稀释溶解STZ, 采用中等剂量(45 mg/kg) 或者高剂量(60 mg/kg) ，一次性静脉注射， 8-10天后成模。

（二）多次小剂量STZ 注射法：

A. Wistar大鼠： STZ 溶于0.1 mol/1. 枸橼酸－枸橼酸钠缓冲液(pH4.4, 4 °C）．配成1.25% 的溶液，按30 mg/kg 剂量给药，每周腹腔注射1次，连续4周，成模率约90% 。用于l 型糖尿病模型制备。

B. SD大鼠：纯种雄性SD大鼠STZ 溶于 0.1 mol/L 枸橼酸－枸橼酸钠缓冲液(pH4.5, 4 °C），配成2.0% 的溶液，按每日30 mg/kg 腹腔注射，连续3天。

成模判定标准：注射后72小时及1个月末，随机血糖> 16.65 mmol/L, 尿糖强阳性，作为糖尿病鼠建模成功标准。

C. ICR 小鼠：5大龄ICR小鼠，按100 mg/kg 腹腔注射STZ(0.1 mol/L 袧掾酸钠稀释， pH4.5),5 天后再补注STZ 60 mg/kg,， 待小鼠断乳后，给予正常饲料饲养4周后剪鼠尾采血，空腹血糖10~ 1 5 mmol/L 为造模成功。

D. 恒河猴： 5 年龄恒河猴，饲喂全价营养颗粒料和青饲料，袧掾酸盐缓冲液(pH4.3) 稀释溶解STZ, 采用30 mg/kg 静脉注射， 15 天后再次注射1~2 次，12-15天后成模。

（三）高脂饲料联合单次小剂量腹腔注射法：

A. SD大鼠：给予高脂饲料（碳水化合物40％ ，蛋白质13％ ，脂肪40％ ，其他7％ ）饲养4个月后，按30 mg／kg腹腔注射STZ，并继续给予高脂饲料饲养10天。用于2型糖尿病模型制备。

B. Wistar大鼠：给予高脂饲料（配方是在标准全价混合饲料的基础上添加10％ 猪油和10％ 豆油，热能含量为22.8 kJ／kg），饲养4周后按30 mg／kg腹腔注射STZ，然后继续给予高脂饲料饲养4周。成模判定标准：非空腹血糖＞16.7 mmol／L作为成模标准。用于2型糖尿病模型制备。

（四）高脂饲料联合多次小剂量腹腔注射法：

A. Wistar大鼠：给予高脂饲料饲养4周后，按30 mg／kg腹腔注射STZ（每周1次，连续2周），并继续给予高脂饲料饲养至20周。成功率约为75％ ，雄性比雌性成功率高。为2型糖尿病模型。

B. 高脂高糖饲料由基础饲料加蔗糖、炼猪油、淀粉等混合而成，总热量为44.3 kJ／kg（蛋白质5％ ，碳水化合物60％ 其中蔗糖为30％ ，脂肪32％ 其中炼猪油为30％ ）。

基础饲料总热量为25 kJ／kg（蛋白质13％ 、碳水化合物53％ 、脂肪6％ ）。