刺激试验-直肠刺激试验

直肠刺激试验目的是评价材料在试验条件下产生直肠组织刺激反应的潜在性。

材料与仪器

器材：

50 ml 烧杯 3 只、连接套管、5 ml 注射器、灭菌饭盒一个、镊子 3 把、手术剪 3 把、50 cm 长的绳子 24 段，标签纸、缝、缝线、组织处理装置。

试剂：

① 固定液；

② 组织处理试剂；

③ 生理盐水；

④ 凡士林。

步骤

直肠刺激试验的基本过程可分为如下几步：

A 将一短软管（6 cm）或一钝头插管与一容量大于 2 ml 的注射器连接，注射器和导管注满后可使动物能接受 2 ml 试验样品；应为每只动物分别准备一套注射器和连接套管。

B 将动物置于固定器中固定，暴露会阴部位，导管插入前用对照液或润滑剂湿润处理，然后将湿润过的导管轻柔的插入直肠，用注射器注入 1 ml 试验液，同法对照组给予 0.9% 氯化钠溶液。

C 每次间隔 24 小时连续重复上述步骤，连续 5 天。

D 在初次接触后 24 小时和每次试验操作前注意记录会阴溢液、红斑和刺激状况。末次接触后 24 小时，完整切下直肠后纵向切开，检查上皮组织刺激、损伤以及坏死情况，并将直肠和大肠的末端放入适当的固定剂中固定后进行组织学评价。

E 试验完成后，所有的动物应按照动物保护和使用审查委员会批准的试验机构的程序处理动物。

注意事项

应使用健康、初成年的白化兔，雌雄不限，同一品系，体重不低于 2 kg。如使用其他种属应经过认可。应使动物适应环境最少 3 天。试验组与对照组每组至少使用 3 只动物，选择健康的以前没有用于试验的动物，每次试验操作前应检查动物直肠排液、水肿和其他感染、刺激和（或）损伤情况。应符合按实验动物保护和使用规范制定的标准操作规范进行。在试验中应按兽医的良好规范特别注意不要导致动物受伤、疾病和濒临死亡。从人道主义的原则考虑，应对动物实施安乐死。