卵母细胞冷冻保存技术快速冷冻法

卵母细胞冷冻保存技术快速冷冻法，是卵母细胞冷冻保存技术慢速冷冻法的改进。

材料与仪器

器材：

0.25 mL 细管、冷冻仪、液氮罐。

试剂：

① 甘油 ;

② PBS ;

③ PBSS（含 20% NCS 的 PBS）。

步骤

卵母细胞冷冻保存技术快速冷冻法的基本过程可分为如下几步：

A. 冷冻保护剂平衡处理卵母细胞后开始以 1 ℃/min 的速度降温；

B. - 5~- 7 ℃ 植冰；

C. 以 0.1~1.0 ℃/min 的速度降温到 - 80 ℃ 或 - 30~- 40 ℃，投入液氮。

注意事项

降温到 - 30～- 40 ℃ 时投入液氮在牛、人和小鼠的卵母细胞应用较多、效果较好。而降温至 - 80 ℃ 投入液氮的报道很少、效果也不理想，现已基本不用。

解冻一般在室温或 37 ℃ 进行。