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从质粒抽提谈起
复旦大学某教授写的有关质粒的好文，贴在这里与大家共享 碱裂解法从大肠杆菌制备质粒，是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。可以我收研究生十几年了，几乎
2024-10-15 -
酵母菌基因组DNA的提取
酵母 菌基因组 DNA的提取一：仪器： 同方法一二：试剂： SE缓冲液（1M山梨醇，0.1MEDTA pH7.5）；溶菌酶（50mg/ml）；20％PVP；蛋白
2024-10-15 -
氯化锂抽提质粒法
1、前四部同苯酚/氯仿溶液抽提法（用Solution I II III处理）2、加等体积的异丙醇，混匀，沉淀DNA，12000rpm离心7min.去上清，尽量去
2024-10-15 -
核酸的浓缩精制
(adapted from Bruce A. Roe, Department of Chemistry and Biochemistry, The Univer
2024-10-15 -
差减杂交法
差减杂交法是目前广泛应用于差异性基因分离和鉴定的方法之一。简单地讲，差减杂交法是基于不同样品间特定核酸序列 ( 基因组 DNA 或 mRNA) 在数量 ( 等位
2024-10-15 -
SDS裂解法提取大量质粒
本法的产量低得多，但却比其他方法更温和，是提取大质粒（大于15kb）的首选方法。试验步骤：1. 将500ml细菌沉淀物洗过后重悬于10ml用冰预冷的10%蔗糖、
2024-10-15 -
定点突变技术从单点突变到多点突变
体外定点突变技术是研究蛋白质结构和功能之间的复杂关系的有力工具，也是我们在实验室中改造/优化基因常用的手段。蛋白质的结构决定其功能，二者之间的关系是蛋白质组研究
2024-10-15 -
凝胶回收及PCR/DNA片段纯化常见问题分析及其解决方案
回收率低膜结合液（MB）使用量不当按每1 mg凝胶或每1 µl DNA溶液加入1 µl膜结合液的比例（1:1）加入膜结合液溶胶不完全尽量将胶切成小块，加入膜结合
2024-10-15 -
琼脂糖凝胶电泳片断的回收
20世纪70年代是一个奠定现代分子生物学的时代，1973年冷泉港实验室的Joseph Sambrook和Phillip Sharp发明了利用琼脂糖凝胶分离DNA
2024-10-15 -
冻融法回收DNA片段
1. 紫外灯下仔细切下含待回收DNA的胶条，将切下的胶条（小于0.6g）捣碎，置于1.5ml离心管中；2. 加入等体积的Tris-HCl饱和酚（pH 7.6
2024-10-15 -
玻璃奶法快速纯化回收DNA片段
本方法有多种用途，主要包括：从琼脂糖凝胶中分离纯化DNA片段；从DNA反应物中纯化目的DNA片段，如回收纯化PCR产物、酶切连接反应中的DNA片段；从探针制备反
2024-10-15 -
小鼠肝基因组DNA制备的实验方法
DNA以核蛋白形式存在于细胞核中，制备DNA的原则是既要将DNA与蛋白质、脂类和糖类等分离，又要保持DNA分子的完整。蛋白酶K及链霉蛋白酶E的应用使这两个原则得
2024-10-15 -
亚精胺纯化DNA方案
利用亚精胺对含多糖、多酚类物质较多的植物、真菌等材料的DNA进行纯化，以去除杂质，利于后续试验。1、加入400mlTris-HCl（100mM 8.0），溶解D
2024-10-15 -
核酸提取基因组DNA的提取
DNA 是遗传信息的载体，是最重要的生物信息分子，是分子生物学研究的主要对象，因此DNA 的提取也应是分子生物学实验技术中的最重要、最基本的操作，如不能有效的完
2024-10-15 -
动物组织细胞基因组的DNA提取
一、实验原理真核生物的一切有核细胞（包括培养细胞）都能用来制备基因组DNA。真核生物的DNA是以染色体的形式存在于细胞核内，因此，制备DNA的原则是既要将DNA
2024-10-15
