常规方法(DNA片段的回收实验)
材料与仪器NA片段纯化试剂盒 异丙醇离心机 电泳仪 电泳槽 取液器 微量真空装置 抽滤装置步骤1. PAGE电泳,如EB染色的则在紫外灯下切下目的片断,如龈染
材料与仪器
NA片段
纯化试剂盒 异丙醇
离心机 电泳仪 电泳槽 取液器 微量真空装置 抽滤装置
纯化试剂盒 异丙醇
离心机 电泳仪 电泳槽 取液器 微量真空装置 抽滤装置
步骤
1. PAGE电泳,如EB染色的则在紫外灯下切下目的片断,如龈染或其他非放染色的则在关下切下目的片断。
2. 用少量脱缓冲液I将目的片断胶条洗至一Eppendorf管中,用玻棒将凝胶捣碎,用150 ul 洗脱缓冲液II将玻棒上的凝胶洗至Eppendorf管中。
3. 振荡后置于37℃3~5小时或过夜。
4. 振荡后离心(10 000 g,10 min),取上清液,并再用200 ul 洗脱缓冲液II洗涤旧管,离心再取上清液。
5. 合并两次上清液,乙醇+醋酸钠沉淀同前。
2. 用少量脱缓冲液I将目的片断胶条洗至一Eppendorf管中,用玻棒将凝胶捣碎,用150 ul 洗脱缓冲液II将玻棒上的凝胶洗至Eppendorf管中。
3. 振荡后置于37℃3~5小时或过夜。
4. 振荡后离心(10 000 g,10 min),取上清液,并再用200 ul 洗脱缓冲液II洗涤旧管,离心再取上清液。
5. 合并两次上清液,乙醇+醋酸钠沉淀同前。