高地辛标记的 DNA 探针制备实验基本方案
材料与仪器DNAdTTP dUTP EDTA SDS水浴锅 培养箱步骤1. 建立一个标准100 μl 反应体系，用10 μl，10地高辛·11-dUTP/dT
材料与仪器
DNA
dTTP dUTP EDTA SDS
水浴锅 培养箱
dTTP dUTP EDTA SDS
水浴锅 培养箱
步骤
1. 建立一个标准100 μl 反应体系，用10 μl，10×地高辛·11-dUTP/dTTP贮液，DNA酶Ⅰ酶量不变，15℃温育2 h。
2. 取小份在微型胶中进行电泳以检测探针大小。
3. 继续反应直到获得大小合适的DNA探针。
2. 取小份在微型胶中进行电泳以检测探针大小。
3. 继续反应直到获得大小合适的DNA探针。
4. 加入2 μl 0.5mol/l EDTA和1 μl 10%SDS，68℃加热10 min 以终止反应。
5. 用G-50离心柱分离探针。
5. 用G-50离心柱分离探针。
6. 用比色法或化学发光法测定地高辛标记的探针。
7. 用碱性磷酸酶偶联的抗地高辛抗体代替链亲和素-碱性磷酸酶交联物。
8. 利用地高辛标记的标唯DNA或是标好的地高辛探针作为对照检测地高辛掺入效率。
7. 用碱性磷酸酶偶联的抗地高辛抗体代替链亲和素-碱性磷酸酶交联物。
8. 利用地高辛标记的标唯DNA或是标好的地高辛探针作为对照检测地高辛掺入效率。
相关文章
