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DNA实验

拟南芥叶片基因组DNA的提取

2024-10-12 DNA实验 加入收藏
一、材料和试剂1. 乙醇2. 异丙醇3. 氯化钠4. EDTA(乙二胺四乙酸)5. SDS(十二烷基磺酸钠)6. Tris,pH7.5二、仪器1. 研钵及研杵2

一、材料和试剂

1. 乙醇

2. 异丙醇

3. 氯化钠

4. EDTA(乙二胺四乙酸)

5. SDS(十二烷基磺酸钠)

6. Tris,pH7.5

二、仪器

1. 研钵及研杵

2. 台式离心机(Eppendorf)

3. 振荡器(VWR)

三、步骤

1. 在1.5 mL 的离心管里加入400 mL Edward提取溶液。

2. 在加入提取液的离心管里将2-3片小叶或1片大叶用研棒磨碎(2-3周的植株)。

3. 振荡器上振荡5秒,室温放置直到其它准备工作准备完毕。

4. 室温16 000 rpm 离心2分钟。

5. 将300 mL 离心后的上清液转移到干净的离心管里。

6. 加入300 mL 异丙醇,混匀后室温放置2分钟。

7. 室温16 000 rpm 离心5分钟,去上清后用70%的乙醇洗沉淀,室温下干燥沉淀。

8. 100 mL 去离子水溶解DNA,贮存在–20°C冰箱里。

9. 吸取2-4 mL DNA溶液用于PCR反应。


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