酵母菌基因组DNA的提取

酵母 菌基因组 DNA的提取

一：仪器： 同方法一

二：试剂： SE缓冲液（1M山梨醇，0.1MEDTA pH7.5）；溶菌酶（50mg/ml）；20％PVP；蛋白酶K缓冲液（10mM Tris pH7.6 0.5% SDS 1mM EDTA）；其余同前

三：操作

1.5ml 对数生长期细菌细胞

离心，12000rpm，1-2min

沉淀

溶于590ulSE缓冲液中混匀+10ul溶菌酶37℃，1hr

离心，12000rpm，8-10min

沉淀

溶于100μL，0.5μl蛋白酶Ｋ，混匀，37℃，1hr

加入1.2ml的CTAB/NaCL，200μl20%PVP 混匀 65℃，30min

等体积酚/氯仿/异戊醇混合液，混匀，

离心，12000rpm，4-5min

上清，以下操作与方法一中有机溶剂抽提、沉淀、干燥、除RNA 、复溶等步骤一致。