溶血反应与补体结合试验

一、溶血反应

免疫血清与其相应的抗原细胞（血球、细菌及其组织细胞）相遇，并在补体的参与下可出现溶细胞反应。依抗原、抗体的种类不同可有溶血反应、溶菌反应等。

溶菌反应只在某些细菌中出现（如霍乱弧菌）。应用溶血反应是补体结合反应中不可少的因素。溶血反应是由于抗原（红血球）和抗体（溶血素）进行特异性的结合，并吸着了补体，而使红血球在补体的作用下被溶解，于是产生了溶血现象。

1、材料

（1）抗原：2%绵羊红血球；

（2）抗体：溶血素；

（3）补体：取健康豚鼠血清作为补体；

（4）小试管、生理盐水、水浴箱。

2、方法

（1）取小试管3只，按下表加入各物（容量单位为毫升）；

（2）将上述3试管放在37℃水浴箱内15—30分钟观察有无凝血现象。

二、补体结合反应

当抗原与其对应的抗体结合时，所生成的抗原抗体复合物能从溶液中将补体吸着此即谓补体结合。参与补体结合反应的抗原是透明的溶液，故补体结合现象不能被肉眼看出来，因此必须借助溶血系统（溶血素及相对应的羊血球）作为指示剂，来判定媒质中有无游离的补体，近而推定媒质中未知抗原（或抗体）和已知抗体（或抗原）是否进行了特异性的结合。本反应具有很高的敏感性及特异性，因之常应用于传染病的诊断，特别诊断病毒疾病和梅毒。

由于参与本反应的各种成分间有着一定量的关系，因此在作本试验之前，必须通过一系列的预备实验来确定各成分的使用量，故本反应的实验方法较为复杂。

本次实验以伤寒杆菌免疫血清与其相对应的抗原补体结合试验为例。

1、材料：

（1）抗原：伤寒的抽出液；

（2）抗体：伤寒杆菌的免疫血清；

（3）补体：豚鼠血清；

（4）溶血素：抗绵羊血细胞的兔血清；

（5）2%绵羊红血球；

（6）小试管、试管架、水浴锅。

3、方法：

预备试验（示教说明） 预备试验包括溶血素效价的滴定，补体效价的滴定，抗原效价的滴定及被检血清的处理。

（1）溶血素效价的滴定 按照下表加入各物

凡最高稀释度的溶血素可呈现完全溶血者为一个单位。依上表结果第10管（即1：4000倍稀释）0.5毫升溶血素为一个单位，在溶血反应中常用0.5毫升中含有2个溶血素单位的溶液，所以试验时应取1：2000倍稀释的溶液。