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免疫荧光双标技术中操作要点和注意事项
一、免疫荧光的标本制作的基本程序同DAB显色的免疫组化,不同点如下:1、免疫荧光不需要使用双氧水处理,封闭和一抗孵育与其它相同。2、免疫荧光的二抗使用不同荧光标
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免疫荧光技术的实验方法及其分类
一、免疫标记法及其分类1.荧光免疫法原理是应用一对单克隆抗体的夹心法。底物用磷酸-4-甲基伞形酮,检测产物发出的荧光,荧光强度与Mb浓度呈正比,可在8min内得
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抗原多肽设计和选择的基本原则
一、抗原多肽设计的基本原则为了使生产抗体获得最佳效果,仔细地设计抗原多肽是很有必要的,设计应满足一个基本条件:在免疫过程中,该抗原既不会产生过强的免疫反应,同时
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类病毒
一、类病毒�20 世纪 70 年代初期,美国学者 Diener 及其同事在研究马铃薯纺锤块茎病病原时,观察到病原无病毒颗粒和抗原性、对酚等有机溶剂不敏感、耐热
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单克隆抗体综述
一、抗体的定义和第一代单克隆抗体(经杂交瘤细胞生产)抗体是在对抗原刺激的免疫应答中,B淋巴细胞产生的一类糖蛋白。它是能与相应抗原特异的结合、产生各种免疫效应(生
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大鼠和小鼠尾静脉注射技巧与心得
一、将小鼠固定好,将尾巴拉直,绷紧小鼠性情较温顺,一般不会咬人,比较容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上,在小鼠向前挣扎爬行时,用
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反向空斑形成试验(RHPA)
一、基本原理反向空斑形成试验(reversed hemolytic plaque assay,RHPA)是一种体外检测人类Ig分泌细胞的方法。该法将待检人的PB
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特异性抗原诱导的细胞毒性T细胞功能测定
一、基本原理本方法先借助长期混合淋巴细胞培养法获得抗原特异性CTL,然后再进行细胞毒试验。其原理为:外周血淋巴细胞包含针对不同抗原的特异性CTL克隆,在体外经某
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佐剂的制备和作用
一、概念 佐剂(adjuvant)是指能够增强免疫应答或改变免疫应答类型的物质,应用时可与抗原同时或预先注射于机体。佐剂本身可以有免疫原性,也可以没有免疫原性。
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噬菌体多肽展示文库及其新药研究中的应用
一、概况噬菌体展示技术(Phage Display Technology)在80年代中期产生, Smith G第一次描述了在丝状噬菌体表面展示外源多肽片段的原理
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单克隆抗体的纯化
一、腹水型单抗的纯化在单抗纯化之前,一般均需对腹水进行预处理,目的是为了进一步除去细胞及其残渣、小颗粒物质、以及脂肪滴等。常用的方法有二氧化硅吸附法和过滤离心法
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免疫组化非特异性染色的消除方法
一、非特异性染色的主要因素 组织的非特异性染色的机理很复杂,其产生的原因主要可分为以下几点: (1)一部分荧光素未与蛋白质结合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透
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免疫组化非特异性背景染色及其控制方法
一、非特异性染色的识别 常出现在组织边缘、胶原纤维及血浆渗出处,坏死组织及固定不良的组织中心处。表现为弥漫性,均匀性的背景染色。也可以是随机分布的阳性反应产物点
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单克隆抗体的非特异性结合阻断
一、反应体系1、 抗体第一抗体,常用的或自备的抗体(1)如果第一抗体或自备的抗体能够进行荧光标记(如FITC,PE或其他),请参考直接染色步骤(2)如果第一抗体
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多克隆抗体技术
一、多克隆抗体的概念抗原刺激机体,产生免疫学反应,由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白,这就是免疫球蛋白,这种与抗原有特异性结合能力的免