HE检测实验报告（五）

一、实验目的对骨组织样本进行脱钙及HE染色。二、实验样本及分组

样本：大鼠、小鼠关节骨组织

分组：第一批、第二批、第三批

三、实验结果

四、实验结论

样本中细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色。细胞质被伊红染成深浅不同的粉红色至深红色。对比鲜明，可以清晰观察到组织形态。

五、实验材料

1. 主要仪器

2.主要试剂

六、实验原理

苏木精-伊红染色法简称HE染色法，是最常用的染色方法。苏木精（hematoxylin）是阳离子染料，能够将细胞核内的嗜碱性物质染成蓝紫色。伊红（eosin）是阴离子染料，能够将细胞质和胶原纤维等染成粉红色。

七、方法步骤

1.脱钙包埋①取大小鼠骨组织中性福尔马林固定。②骨组织浸入EDTA脱钙液，每周更换一次脱钙液，脱钙4-12周（根据组织大小决定）。③脱钙终点评判：针扎切割无阻力感。④脱钙结束后的骨组织用自来水流水冲洗12-24h。⑤骨组织脱水浸蜡包埋切片。2. 脱蜡①70℃烤片30 min；②二甲苯（I）中脱蜡10 min；③二甲苯（II）中脱蜡10 min；④100%乙醇（I）中5 min洗去二甲苯；⑤100%乙醇（II）中5 min洗去二甲苯；3.水化
①95%乙醇中水化5 min；②85%乙醇中水化5 min；③75%乙醇中水化5 min；
④蒸馏水中水化待用；4.染色①苏木素染色3 min；②流水冲洗2 min；③1%盐酸酒精分化2 s；④流水冲洗切片15 min；⑤蒸馏水过洗1-2 s；
⑥伊红染色30s；5.分化①根据颜色深浅用80%的乙醇分化；②85%乙醇脱水5 min；③95%乙醇脱水5 min；④无水乙醇脱水10 min；
⑤无水乙醇脱水10 min；6.透明①二甲苯（I）透明10 min；
②二甲苯（II）再次透明10 min；7.封片
①在石蜡切片的中央滴加一滴中性树胶，盖上盖玻片封固。8.镜检

①显微镜下观察拍照。