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caspase-3的检测方法
问:在本版里有看到过有关caspase-3的检测方法(1):免疫细胞化学检测caspase-3蛋白的表达,用悬浮的细胞(2):western blot 理想结果
2025-03-20 68 -
做稳定转染选择何种质粒提取试剂盒
问:我想用纸脂体转染法将质粒稳定转染入肿瘤细胞,请问可以选择哪种试剂盒? 因为我不报销费用,所以想选一种即好用又较为便宜的,请求指点。谢谢答:您的情况我们去年也
2025-03-20 57 -
请教 luciferase 的 具体操作PROTOCOL
问:我要做LUCIFERASE 了,可是我一点概念都没有。有哪位有具体的操作PROTOCOL?还有一些白痴问题luciferase 要检测什么呢?是把我的带有L
2025-03-20 63 -
GFP转染后克隆筛选
问:我最近对肿瘤细胞转染GFP,其中不含有其他外源性基因。转染后短期内发现阳性细胞非常多,可是随着时间及细胞的增殖,培养孔内的细胞总数在不断的增加,但是发绿色荧
2025-03-20 70 -
免疫磁珠分选的问题
问:现用免疫磁珠(美天妮)分选cd4+和cd8+T淋巴细胞,效果不是太理想。单个核细胞2106,分离出cd4+只有1105个,buffer等试剂都没有问题。不知
2025-03-20 53 -
细胞稳定转染建系后再转染的问题
问: 细胞稳定转染建系后,转染的质粒细胞内本身有较高表达,我的质粒是点突变的质粒,我做的是稳定转染,按理论稳定建系后不应该对细胞增值有影响的。根据实验设计,我往
2025-03-20 59 -
如何提高U251的转染效率
问:手上有U251细胞,pEGFP载体,现在将不带外源基因的载体转u251的效率都很低,10%都没有。所用转染试剂:invitrogen的Lipofectami
2025-03-20 72 -
免疫荧光双标
问:神经干细胞nestin和EphrinA4的免疫荧光双标怎么做?答:过程和一般的免疫染色一样就是封闭的时候用两种血清混合封闭1:1加入一抗和二抗的时候也是混合
2025-03-20 51 -
Immunohistochemical Analysis of 8-Nitroguanine, A Nitrative DNA Lesion, in Relation to Inflammation-
Chronic inflammation is induced by various infectious/infected agents and by man
2025-03-20 71 -
转染过程
问:哪位高手给分别指点一下脂质体和质粒转染的具体过程!答:具体过程都大至差不多,一管混匀质粒,另一管混匀脂质体,脂质体混匀后过几分钟,逐滴加入混匀的脂质体,温柔
2025-03-20 66 -
稳定转染细胞株的鉴定
问:目的蛋白7kd,筛了稳定株,可western检测不到,因为电泳时marker也跑得不好,因此不能确定是假阳性。载体上带了myc tag,不知做免疫荧光来检测
2025-03-20 67 -
同一种细胞,不同质粒转染,那G418筛选浓度都一样吗
问:跟文献上的细胞一样,但跟他的质粒不一样,文献上说G418筛选浓度为500mg/ml,那我可以直接用这个浓度筛选我转染以后的浓度吗?质粒的不同对同一细胞的G4
2025-03-20 76 -
关于CHO-K1细胞稳定转染和瞬转COS的问题
问:各位大虾小弟我最近一直在瞬转COS细胞分泌表达上清一直没有表达也浓缩过再做ELISA WB 都没有啊时间挺长了实在等不及了就想稳定转染cho-k1细胞系通过
2025-03-20 57 -
悬浮细胞转染后筛选问题求助
问:大家好,我第一次作转染,是悬浮细胞,已经在园子里看了好多这方面的资料,收获很大,可还是几个问题要问大家:1)我打算用24孔板作转染,之后的筛选过程中肯定会有
2025-03-20 85 -
逆转录病毒包装
问:大家好,请问有人做过逆转录病毒包装吗,我最近在用PT67包装病毒,按照说明书上的要求,在细胞长到70%左右汇合时加入质粒和脂质体和无血清培养液培养4小时后更
2025-03-20 70