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western-blot实验常见问题及解答
常见问题解决对策两块玻璃板之间灌胶，胶总是不平玻璃没有洗干净，应该洗得很干净过硫酸铵和TEMED加量相对较多加完试剂后应摇匀 总是漏胶避免玻
2025-01-08 82 -
从革兰氏阴性菌（如E.coli）中分离DNA
从细菌中分离DNA 需要依赖SDS 和蛋白酶K 以裂解细胞。高分子质量的DNA 需要剪切（以减少它的黏性，更适合操作），用酚和氯仿提取，再用异丙醇提纯。该方案可
2025-01-08 104 -
分子克隆中常用的其他酶
一、DNA 聚合酶分子克隆中的许多步骤都涉及在DNA 聚合酶催化下的DNA 体外合成反应。这些酶作用时大多需要模板，合成产物的序列则与模板互补。大多数聚合酶优先
2025-01-08 110 -
体外转录法制备dsRNA
该方案是简单而且得到广泛应用的、利用PCR 模板制备双链RNA 的体外转录反应。该方法制备的dsRNA 可以用于在某些细胞或者组织中诱发RNA 干扰。试剂琼脂糖
2025-01-08 121 -
DNA分离前你应该知道的那些事
DNA 是相当稳定的。这也是保存和传递遗传信息所必须具备的但是不能因此而太随意，DNA的污染来源主要是其他DNA 。DNA 分离分离的DNA可以是基因组的也可以
2025-01-08 126 -
Western-blot化学发光(ECL)时，胶片上条带很弱是什么原因？
条带弱的原因可能有以下几个方面：①. 因为蛋白上样量低或目的蛋白在来源组织或细胞中的表达量并不丰富造成。可适当加大蛋白上样量，也可通过提高抗体稀释度或采用灵敏度
2025-01-08 79 -
EMSA实验步骤
一、探针的标记如下设置探针标记的反应体系：（1）待标记探针 (1.75 pmol/μl) ：2μl（2）T4 Polynucleotide Kinase Buf
2025-01-08 83 -
造成western-blot发光时发生荧光淬灭的因素有哪些？
荧光淬灭是Western Blot发光时常见的现象，即加ECL发光液后立刻可以看到很明显的亮光，但亮光很快就消逝了，压完片后条带却很弱，甚至没有条带，发生这种情
2025-01-08 90 -
实时荧光定量PCR为什么倍受青睐？
一、 实时荧光定量PCR技术是一种新型的科学定量方法，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行
2025-01-08 112 -
转子的类型及用途
转子主要有4 种类型：角式、外摆式、连续流式以及区带式。只有角式与外摆式转子是标准的实验室仪器，另外两种只用作专门用途。角式转子用途：样品浓缩。实验室中的“苦力
2025-01-08 86 -
慢病毒感染后，未能实现相关敲降的原因是什么？
慢病毒感染后未能实现敲降的原因可能有多种。以下是一些可能的原因及其解释：慢病毒包装质量问题：病毒滴度较低，导致感染效率不高，可能无法有效转导目标细胞。病毒颗粒中
2025-01-08 69 -
降落PCR实验原理及步骤
降落PCR（touchdown PCR），一种PCR技术，主要用于PCR的条件的优化。在许多情况下引物的设计使得PCR难以进行，例如特异性不够易错配等。退火温度
2025-01-08 73 -
测定蛋白质浓度前需要知道什么？
因为蛋白质是细胞结构与功能的主要分了成分，因此常常需要测定样品中蛋白质的含量，鉴定混合物中的特殊蛋白质，以及分析蛋白质的组成和序列。此外，蛋白质分析对合成用于诱
2025-01-08 76 -
Northern Blot原理及所需仪器、试剂
一、原理：在变性条件下将待检的RNA样品进行琼脂糖凝胶电泳，继而将在凝胶中的位置转移到硝酸纤维素薄膜或尼龙膜上，固定后再与同位素或其它标记物标记的RNA探针进行
2025-01-08 51 -
RNA的提取方法及原理
RNA提取原理RNA提取时，加氯仿后分三层：水相(含rna,可能还有少量DNA），中间白色薄层（应该是蛋白和DNA），下层有机相（氯仿和蛋白等）氯仿是分子量比较
2025-01-08 54
